內容簡介
《藥用植物組培快繁實務》根據現代植物組織培養技術理論和方法,闡述瞭藥用植物在組織培養工廠化快速繁殖育苗技術的應用技能與研究開發方法。以項目為載體,以能力培養為核心,以實務案例教學為主綫。編排瞭28個實務案例,包括藥用植物組織培養實驗室規劃設計、培養基設計與配製、藥用植物離體組織培養的技術、藥用植物無病毒苗的培育、藥用植物組培技術研發、藥用植物組培苗快繁工廠化生産技術。分門彆類介紹常用藥用植物的根和根莖類藥材、草本類藥材、木本類藥材的組織快繁技術,供同學們實驗、實訓時參考。在突齣能力培養同時,強調理論知識的應用性和生産實踐行知培養,編排瞭藥用植物組培技術研發,為學有餘力的學生進一步深入學習研究開發組培相關技術奠定基礎。
《藥用植物組培快繁實務》適用於中、高等職業院校中的生物技術、生物科學、農學、林學、園藝、中藥材栽培等生物相關專業教材,也可供從事組培相關生産經營管理、技術員工培訓教材及中藥材種植人員參考。
內頁插圖
目錄
前言
緒論
項目一 藥用植物組織培養實驗室規劃設計
任務1 實驗室規劃與設計
任務2 實驗室常用儀器、器皿及器械的使用與管理
任務3 案例
【思考與練習】
項目二 培養基設計與配製
任務1 植物組織培養基的種類
任務2 植物組織培養基的選擇
任務3 植物組織培養基的製備
任務4 案例
【思考與練習】
項目三 藥用植物離體組織培養的技術
任務1 滅菌技術
任務2 材料的選擇與消毒
任務3 試管苗接種
任務4 試管苗培養
任務5 試管苗的啓動與增殖培養
任務6 試管苗壯苗與生根培養
任務7 試管苗煉苗與假植
任務8 試管苗移栽
任務9 案例
【思考與練習】
項目四 藥用植物無病毒苗的培育
任務1 熱處理脫毒
任務2 莖尖培養脫毒
任務3 其他途徑脫毒
任務4 病毒植物的鑒定
任務5 無病毒植物的保存和利用
任務6 案例
【思考與練習】
項目五 藥用植物組培技術研發
任務1 組培快繁研究的技術路綫
任務2 組培試驗的設計方法
任務3 組培試驗方案的製訂
任務4 組培試驗成果觀察與數據調查
任務5 組培試驗結果分析
任務6 案例
【思考與練習】
項目六 藥用植物組培苗快繁工廠化生産
任務1 工廠化生産基地規劃與設計
任務2 工廠化生産的設施、設備、器材
任務3 組培快繁工廠化的生産技術
任務4 組培快繁工廠化生産的經營管理
【思考與練習】
項目七 常用藥用植物組織培養技術
任務1 根和根莖類藥材的組織培養技術
案例1 百閤藥用植物組織培養技術
案例2 黃連藥用植物組織培養技術
案例3 人參的組培快繁技術
案例4 懷山藥的組培快繁技術
案例5 黃花白芨組培快繁技術
案例6 多花黃精組培快繁技術
任務2 草本類藥材的組織培養技術
案例1 颱灣金綫蓮組織培養技術
案例2 庫拉索蘆薈的組培快繁技術
案例3 丹參的組培快繁技術
案例4 鐵皮石斛的組培快繁技術
案例5 菊花組培快繁技術
任務3 木本類藥材的組織培養技術
案例1 金銀花的組培快繁技術
案例2 羅漢果的組培快繁技術
案例3 黃花倒水蓮組培快繁技術
案例4 貫葉連翹組培快繁技術
案例5 遠誌組培快繁技術
案例6 枸杞的組培快繁技術
【思考與練習】
附錄
附錄一 常用培養基配方
附錄二 培養物的不良錶現、可能原因及改進措施
附錄三 蒸汽壓力與蒸汽溫度對應錶
附錄四 乙醇稀釋,稀酸、稀堿的配製方法
附錄五 常見抗生素的配製和貯存
附錄六 常見植物激素的配製和貯存
附錄七 植物組織培養中常用的消毒劑
附錄八 常用植物生長激素濃度單位換算錶
參考文獻
彩圖
精彩書摘
(七)培養材料的支持物及其他添加物
1.培養材料的支持物
除鏇轉和振蕩培養外,為使培養材料在培養基上固定生長,要外加一些支持物。
目前,瓊脂是一種極為理想的支持物。它是從海藻中提取的多糖類物質,它不是培養基中的必需成分,隻是作為一種凝固膠粘劑使培養基變成固體或半固體狀態,以支持培養物。雖然瓊脂隻是一種膠狀物。但由於其生産方式和廠傢不同而可能含有數量和種類不等的雜質,如Ca、Mg、Fe、硫酸鹽等,從而可能影響到培養效果或試驗結果。在選擇瓊脂時,最好購買固定廠傢的優質商品。瓊脂的使用濃度取決於培養目的、使用的瓊脂性能(腖力張度、灰分、熱水中不溶物、粗蛋白等)等因素,一般濃度為0.4%~1%,質量越差的瓊脂用最越大。除瓊脂外,為瞭更好地調控培養物的生長,現在發展的趨勢是使用一種含有瓊脂的混閤物作為固體膠粘劑。如Sigma公司生産的Agargel就是用瓊脂和Phytagl混閤在一起的一種新型膠粘劑,可以用來控製培養物的玻璃化。如果經濟條件允許,建議使用新型混閤物來代替瓊脂,可能會使試驗獲得更為理想的結果。
培養基中添加瓊脂使培養基呈固體或半固體狀態,使培養物能夠處於錶麵,既能吸收必需的養分、水分,又不緻因缺氧而死亡。但固體或半固體狀態,一方麵限製瞭培養基中營養成分和水的移動,另一方麵也限製瞭培養的植物組織分泌物特彆是有毒代謝産物的擴散,使培養物周圍的營養成分逐漸匱乏,代謝産物逐漸積纍,植物生長受阻或受到毒害。為瞭解決這個問題,人們試驗使用其他支持物來代替瓊脂。濾紙橋法即是一種,該法是將一張較厚的濾紙摺疊成M型,放入液體培養基中,將培養的植物組織放在M的中間凹陷處,這樣培養物可通過濾紙的虹吸作用不斷吸收營養和水分。又可保證有足夠的氧氣。在此基礎上,又發展齣瞭一種類似於“看護”培養的方法,即在濾紙橋的中間凹陷處加一種固體培養基,固體培養基中也可混有分散的植物細胞團,將材料放在固體培養基上,再把濾紙放入另一種液體培養基中,用兩種不同的培養基同時培養材料,可收到較好的效果。現在也有用玻璃縴維濾器或人工閤成的聚酯羊毛代替濾紙的報道,並獲得瞭成功。從濾紙、玻璃縴維濾器和聚酯羊毛代替瓊脂的試驗中人們或許能受到一些啓發,即培養基中添加瓊脂的目的主要是為瞭支持培養物,隻要達到這個目的,可選用不同的材料和方法來進行代替瓊脂的試驗。需要考慮的主要問題是,這種材料必須無毒害作用,且不被培養的植物組織所吸收,不與培養液成分發生化學反應。
瓊脂作為支持物或凝固劑對絕大部分植物都是有利或者無害的,但也有一些報道錶明瓊脂對某些培養物不利。在馬鈴薯、鬍蘿蔔、煙草、小麥等作物組培中,均發現以澱粉代替瓊脂更有利於培養物的生長和分化。
2.活性炭(AC)
活性炭能從培養基中吸附許多有機物和無機物分子,它可以清除培養的植物組織在代謝過程中産生的對培養物有不良或毒副作用的物質,也可以調節激素的供應。也許是由於活性炭的存在使培養基變黑,産生瞭類似於土壤的效果,以利於植物的生長。還有報道指齣,活性炭有刺激胚胎發生或組織生長和形態發生的作用。活性炭來源的不同也可能使它所起的作用不同,如木材活性炭比骨質活性炭含有更多的碳,而骨質活性炭中含有的混閤物可能對培養物有副作用。活性炭的一般用量為0.5%~3%。
(八)抗生物質
培養的植物組織很容易發生細菌或真菌汙染。引起的原因是多方麵的,有的是消毒不徹底,有的是無菌操作過程中器皿或操作人員不注意,有的是培養過程中由於培養容器的蓋子破損或沒紮緊,有的是培養的植物組織內部攜帶有病原物。汙染常給組培工作帶來很大影響或損失,尤其是已經培養一段時間的材料再發生汙染所造成的損失更大。為瞭解決或防止這個問題,可在配置培養液時添加抗生素,如加200~300U的慶大黴素可使細菌汙染受到很好的控製。濃度超過600U時可在一定程度上抑製分化。但這種抑製作用可在除去慶大黴素後一段時間內得到恢復。
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前言/序言
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