乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書 [Handbook： Stem Cell Biology] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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周琪，郝捷，王柳 編

圖書標籤:

• 乾細胞
• 細胞生物學
• 實驗技術
• 生物學
• 分子生物學
• 生物工程
• 實驗室手冊
• 研究方法
• 生命科學
• 醫學

齣版社： 中央廣播電視大學齣版社

ISBN：9787304071868

版次：1

商品編碼：12085600

包裝：平裝

叢書名： 生物學實驗指南叢書

外文名稱：Handbook： Stem Cell Biology

開本：16開

齣版時間：2015-07-01

用紙：膠版紙

頁數：160

字數：354000

正文語種：中文

內容簡介

　　《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》是進行乾細胞研究的實驗技術類書籍。乾細胞研究日新月異，推齣一本既能體現目前乾細胞技術的水平，又對科研人員的具體實驗操作有實際指導作用的圖書是我們的初衷。對於實驗室新人來說，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》力求使他們能夠迅速地瞭解乾細胞實驗所涉及的領域，省時省力地學會做實驗。對於已有實驗室工作經驗的人來說，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》力圖擴展他們的視野。對於導師來說，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》可部分替代他們對學生基本知識和實驗技能的傳授。對於生物儀器、試劑公司的業務人員來說，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》可以使他們瞭解乾細胞實驗的基本需求，在推廣産品時可以有針對性，錶現齣個人和公司的專業素養。

目錄

第一章 乾細胞概述
一、乾細胞的定義與特性
二、乾細胞的分類
三、乾細胞的研究曆史及熱點
參考文獻

第二章 乾細胞培養技術概述
第一節 概述
一、細胞培養的優勢
二、細胞培養的限製
三、細胞培養的應用
四、細胞培養的基本條件
五、細胞培養的無菌原則
六、細胞實驗的注意事項
七、細胞培養液的成分及配製
第二節 乾細胞常用培養方法
一、細胞培養方式
二、原代取材
三、傳代培養
第三節 乾細胞的凍存與復蘇
一、細胞的凍存
二、細胞復蘇的過程
第四節 細胞汙染的檢測與鑒定
一、細胞汙染
二、細胞汙染的預防
第五節 乾細胞鑒定方法
一、細胞形態觀察
二、核型分析
三、免疫組織化學熒光染色
四、分子水平分析
五、流式細胞分析
六、細胞弧群分析
七、繪製細胞增殖麯綫
八、細胞凋亡檢測

第三章 胚胎乾細胞
第四章 誘導性多能乾細胞
第五章 神經乾細胞
第六章 造血乾細胞
第七章 間充質乾細胞
第八章 精原乾細胞
第九章 乾細胞實驗室的建設
附錄
索引

精彩書摘

　　《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》：
　　造血乾細胞（HSCs）是迄今為止研究最為透徹的成體乾細胞。1961年Till和McCulloch等在分析骨髓中負責血液再生的細胞時用瞭兩個特徵來定義HSCs（Till and McCulloch，1961），一是可以進行自我更新，二是可以産生所有血細胞類型。經過近50多年的研究，隨著對HSCs的瞭解不斷深入，HSCs可以從骨髓、臍帶血和動員後的外周血中分離獲得。HSCs較早應用於臨床，用於治療癌癥、血液疾病以及一些免疫係統疾病。另外，HSCs還具有轉分化成神經細胞、肌肉細胞以及肝細胞等細胞的能力（Wagersand Weissman，2004）。因此與其他成體乾細胞相比，HSCs具有不可比擬的優勢。
　　HSCs在體內需要保證機體血液供應、維持內環境穩態以及在緊急齣血或機體受到損害的情況下快速産生大量成熟的血細胞，因此HSCs需具備以下功能（Morrison and Kimble，2006）：可自我更新或凋亡以維持自身的數量穩定；可迅速進入分化狀態形成血細胞；可遷移至身體其他部位；可維持自身在骨髓中的內環境穩態。所以HSCs最主要的特徵就是自我更新以及具有多嚮分化成所有血細胞類型的潛能。檢驗小鼠HSCs的黃金標準是把細胞注射到接受過一定射綫照射後自身造血細胞被全部殺死的小鼠中，重建小鼠的造血係統。驗證人HSCs的功能則需要將其移植到造血係統被射綫破壞的非肥胖糖尿病／重癥聯閤免疫缺陷小鼠（Nonobese Diabetic／Severle Combined Immunodeficient Mice，NOD／SCID小鼠， 即在SCID小鼠的基礎上與NOD／Lt品係迴交的免疫缺陷鼠）中，檢測其是否能夠恢復小鼠的造血功能（Blank et al.2008）。
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《分子生物學技術與實踐》 本書介紹 《分子生物學技術與實踐》是一本全麵涵蓋現代分子生物學核心技術與其實際操作流程的權威指南。本書旨在為生命科學領域的研究人員、高年級本科生和研究生提供一個深入、係統且實用的實驗參考手冊。我們深知，分子生物學是現代生物學研究的基石，其技術棧的熟練掌握程度直接決定瞭科研工作的深度與廣度。因此，本書的設計核心在於“實踐性”與“前沿性”的結閤，確保讀者不僅理解理論基礎，更能熟練運用各種實驗方法解決實際科研問題。 本書內容結構嚴謹，從基礎的核酸提取、純化，到復雜的基因剋隆、錶達調控分析，再到最新的高通量測序技術及生物信息學初步應用，構建瞭一個完整的分子生物學實驗技術知識體係。全書共分為八個主要部分，涵蓋瞭超過百種經典及前沿實驗方法。 --- 第一部分：分子生物學基礎技術與試劑製備 本部分是所有高級實驗的起點。我們詳細闡述瞭在無菌環境下進行所有操作的前提條件。 1.1 實驗室安全與規範： 涵蓋瞭生物安全等級（BSL-1至BSL-3）的區分、化學品安全操作規範（MSDS解讀）、生物廢棄物處理流程，以及個人防護裝備（PPE）的正確使用方法。強調瞭交叉汙染的預防策略，尤其是在進行敏感的PCR和細胞培養實驗時。 1.2 緩衝液、培養基與試劑的配製： 提供瞭數百種常用緩衝液（如Tris-HCl, PBS, TAE, TBE, RIPA, NP-40 Lysis Buffer）的精確配方及配製步驟。重點講解瞭pH值調節的技巧、過濾除菌（微孔濾膜的選擇）以及分裝與儲存條件，確保試劑活性最大化。同時，詳細列齣瞭細菌和酵母菌標準培養基（LB, SOB, YPD）的詳細配方及優化參數。 1.3 基礎儀器操作與維護： 涵蓋瞭離心機（從颱式到超速離心機）、pH計、電泳儀、紫外分光光度計、振蕩培養箱的日常操作、校準與簡易故障排除。特彆強調瞭如何通過測試確保設備的準確性。 --- 第二部分：核酸的提取、純化與定量 核酸的質量是後續所有分子生物學實驗成功的關鍵。本部分緻力於提供針對不同樣本類型（組織、細胞、血液、植物、微生物）的最佳提取方案。 2.1 DNA提取與純化： 針對石蠟包埋組織（FFPE）、高黏度組織（如腦組織）和富含多糖的植物材料，提供瞭優化的裂解方案。詳細對比瞭酚氯仿抽提法、矽膠柱純化法和磁珠法的優缺點及適用場景。 2.2 RNA的提取與保護： 重點介紹瞭如何最大程度地保護RNA免受RNase降解。提供瞭Trizol法和商業試劑盒法的詳細操作流程，並特彆關注瞭從低拷貝細胞或新鮮組織中提取高質量總RNA的技巧，如使用RNase抑製劑和液氮研磨。 2.3 核酸的質量評估與定量： 深入講解瞭使用紫外分光光度計（A260/A280, A260/A230比值解讀）和瓊脂糖凝膠電泳來評估核酸的純度和完整性。詳細介紹瞭使用熒光定量係統（如NanoDrop, Qubit）進行精確定量的標準麯綫建立和數據分析。 --- 第三部分：PCR技術及其高級應用 聚閤酶鏈式反應（PCR）是分子生物學的核心技術，本書對其進行瞭最詳盡的闡述。 3.1 標準與實時熒光定量PCR (qPCR)： 詳細解析瞭Taq酶的特性、引物設計原理（Tm值、發夾結構預測）和PCR反應體係的優化（Mg2+濃度、退火溫度的確定）。qPCR部分深入講解瞭SYBR Green和TaqMan探針法的原理、標準麯綫的繪製、溶解麯綫分析以及絕對定量與相對定量（ΔΔCt法）的計算流程。 3.2 反轉錄PCR (RT-PCR) 與逆轉錄定量PCR (RT-qPCR)： 區分瞭cDNA閤成中一步法與兩步法的優劣，並針對RNA的微量樣本提供瞭高效率的cDNA閤成方案。 3.3 各種變體PCR技術： 涵蓋瞭高保真PCR（如使用Proofreading酶）、長片段PCR、Touchdown PCR、以及用於單細胞分析的微量PCR技術。 --- 第四部分：基因剋隆與重組DNA技術 本部分是基因工程實驗的“藍圖繪製”階段，涉及質粒構建、外源基因的導入與錶達。 4.1 限製性內切酶的應用： 提供瞭數十種常用限製酶的切割位點圖譜、反應條件錶，以及“平末端”和“粘性末端”的酶切策略。講解瞭酶切産物的迴收方法（凝膠迴收與PCR産物純化）。 4.2 連接反應與載體構建： 詳細介紹瞭T4 DNA連接酶的催化原理，並重點對比瞭經典粘性末端連接、平末端連接、以及更高效的基於同源重組的剋隆技術（如Gibson Assembly, In-Fusion）。 4.3 基因的穩定與篩選： 介紹瞭轉化大腸杆菌的效率提升技巧（如熱激法、電轉化法）。重點闡述瞭抗性篩選、藍白斑篩選體係的原理與操作細節。對於復雜的載體構建，提供瞭序列驗證（Sanger測序）的結果解讀方法。 --- 第五部分：蛋白質的錶達、純化與分析 從基因到功能性蛋白的轉化是理解生命活動的關鍵。 5.1 原核與真核錶達係統： 詳細對比瞭BL21/pET係統（誘導錶達）、酵母錶達係統以及哺乳動物細胞（如HEK293T）瞬時轉染錶達的優缺點。重點講解瞭如何通過優化誘導劑濃度、溫度和錶達時間來解決目標蛋白在原核係統中的錶達不溶性問題。 5.2 親和標簽與蛋白純化： 深入解析瞭最常用的標簽（His-tag, GST, MBP）的特性，並詳細指導瞭親和層析柱（鎳柱、榖胱甘肽柱）的平衡、上樣、洗脫和再生流程。提供瞭洗脫液優化（如咪唑濃度梯度）的實用建議。 5.3 蛋白質的定量與檢測： 介紹瞭Bradford法、BCA法和Lowry法的適用性。重點講解瞭SDS-PAGE電泳的原理、膠的製備、上樣標準以及Western Blotting（蛋白質免疫印跡）的完整流程，包括一抗/二抗的選擇、封閉條件和顯影方法的優化，以實現高靈敏度的目的蛋白檢測。 --- 第六部分：核酸和蛋白質的互作研究技術 本部分聚焦於研究分子機器如何在細胞內協同工作。 6.1 酵母雙雜交（Y2H）係統： 提供瞭構建誘餌（Bait）和獵物（Prey）載體的設計原則，以及篩選策略（營養缺陷型篩選）。重點討論瞭假陽性結果的排除方法。 6.2 共免疫沉澱（Co-IP）： 詳細說明瞭裂解緩衝液對蛋白復閤物穩定性的影響，抗體選擇的標準，以及在Western Blot中驗證互作的信號模式分析。 6.3 DNA/RNA免疫沉澱（ChIP/RIP）： 提供瞭染色質免疫沉澱（ChIP）實驗中交聯、打斷（超聲或酶切）、免疫沉澱和DNA富集的全流程指導，特彆關注瞭ChIP-qPCR的定量分析方法。 --- 第七部分：細胞生物學實驗技術基礎 分子生物學研究的最終目標常常落腳於細胞功能層麵。 7.1 細胞係培養與傳代： 涵蓋瞭對哺乳動物細胞（貼壁與懸浮）的基礎培養技術，包括無菌操作、培養基的篩選與優化（血清批次效應）、細胞計數（血球計數闆與自動計數儀）及凍存復蘇技術。 7.2 轉染與穩定細胞株的建立： 對比瞭磷酸鈣共沉澱法、脂質體介導轉染和電穿孔法在不同細胞類型上的適用性。詳細介紹瞭如何通過篩選藥物（如嘌呤黴素、潮黴素）建立穩定錶達細胞株的篩選方案。 7.3 細胞功能與形態學分析： 包括MTT/CCK-8法進行細胞活性測定、細胞凋亡的Annexin V-FITC染色流式細胞術分析、以及熒光顯微鏡下的免疫細胞化學（ICC）和免疫熒光（IF）技術，重點講解瞭固定、通透、封閉和抗體孵育的步驟優化。 --- 第八部分：生物信息學初步與數據處理 現代分子生物學實驗高度依賴數據分析。本書提供瞭一個實用的入門路徑。 8.1 基因序列數據庫檢索： 介紹如何高效使用NCBI GenBank、UniProt等核心數據庫進行序列查找、BLAST比對和同源性分析。 8.2 輔助軟件應用： 推薦並簡要介紹瞭用於引物設計（Primer3）、蛋白質結構預測（如使用在綫工具）和電泳條帶/印跡圖像的定量分析軟件，強調瞭原始數據處理的規範性。 --- 《分子生物學技術與實踐》不僅是一本手冊，更是一部實驗方法學的“工具箱”。每一章均配有詳細的“故障排除（Troubleshooting）”專欄，預設瞭實驗中可能遇到的常見問題，並提供瞭基於經驗的解決方案，旨在幫助讀者繞開彎路，快速掌握前沿的分子生物學技術。本書的深度和廣度確保瞭其能夠成為實驗室中不可或缺的案頭參考書。

評分☆☆☆☆☆

這本《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》我真是太驚喜瞭！當我拿到它的時候，就被它沉甸甸的分量和精美的封麵設計所吸引。我是一名剛入行的實驗室研究員，對於乾細胞領域充滿瞭好奇，但又缺乏係統性的指導。以前，我都是零散地從各種期刊文章和在綫論壇上搜集信息，費時費力不說，還經常會遇到實驗操作上的瓶頸，不知道該如何規範地進行，更彆提如何解讀實驗結果瞭。這本書簡直像及時雨一樣，讓我眼前一亮。它的排版清晰，邏輯性很強，從最基礎的乾細胞培養技術，到復雜的定嚮分化誘導，再到各種下遊的分子生物學檢測方法，幾乎涵蓋瞭我所有可能會遇到的實驗環節。而且，書中對於每個實驗步驟的描述都非常詳盡，配上瞭高質量的插圖和流程圖，這對於我這種需要手把手指導纔能更好地理解和操作的人來說，簡直是福音。我特彆欣賞它對實驗原理的深入淺齣講解，讓我不再是機械地重復操作，而是能夠理解為什麼這樣做，這樣在遇到意外情況時，也能夠更靈活地應對。這本書讓我對乾細胞研究充滿瞭信心，感覺自己離掌握這項前沿技術又近瞭一大步。

評分☆☆☆☆☆

這本書的編排方式真是太值得稱贊瞭！《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》的章節劃分非常閤理，每個部分都像是一個獨立但又相互關聯的模塊。我最喜歡的是它在介紹每個實驗技術時，都會先簡要迴顧相關的生物學概念，然後詳細描述操作步驟，最後再進行結果分析和可能遇到的問題排除。這種結構清晰、邏輯嚴謹的設計，極大地提高瞭閱讀效率。我常常會在進行某個實驗之前，翻閱書中的相關章節，對照自己的操作，檢查是否有遺漏或者不當之處。書中的圖錶也非常精美，很多圖片都展示瞭細胞的真實形態，這對於我這種需要通過形態學來判斷細胞狀態的研究者來說，非常有參考價值。而且，書中還特彆強調瞭實驗的標準化和可重復性，這一點在生物學研究中尤為重要，能夠幫助我們建立可靠的實驗流程，減少實驗誤差。總而言之，這是一本能夠讓你“看得懂，做得到”的實驗指南。

評分☆☆☆☆☆

從一個資深研究者的角度來看，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》是一部非常紮實的工具書。我參與乾細胞研究已經有十幾年瞭，見識過不少實驗手冊，但這本書在細節的嚴謹性和實用性上，確實做到瞭一個很高的水平。它不僅羅列瞭各種實驗方法，更重要的是，它深入剖析瞭每種方法背後的生物學原理，以及潛在的注意事項和陷阱。例如，在關於細胞係建立的部分，書中詳細解釋瞭不同傳代方式對細胞特性可能産生的影響，並提供瞭相應的監測策略，這一點對於保證實驗數據的可靠性至關重要。而且，它還引用瞭大量近期發錶的文獻，能夠幫助讀者快速瞭解該領域的最新進展和技術趨勢，這對於保持研究的前瞻性非常有益。我尤其喜歡書中關於質量控製和數據分析章節的闡述，這部分往往是許多研究者容易忽視但又至關重要的環節。它提供的詳細指導，能夠幫助我們避免重復的錯誤，更有效地解讀和呈現研究結果。對於需要穩定、高質量乾細胞研究的實驗室來說，這本書無疑是不可或缺的參考。

評分☆☆☆☆☆

我是一名即將畢業的博士生，正在為我的論文收集實驗方法。在查找瞭大量的文獻後，我偶然發現瞭這本《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》。老實說，我一開始對它並沒有抱太高的期望，畢竟實驗手冊這種東西，很多時候隻是列齣一些流程，缺乏深度。但當我開始閱讀這本書時，我被它所展現齣的深度和廣度深深吸引瞭。書中不僅包含瞭標準的乾細胞培養和分化技術，還深入探討瞭各種關鍵步驟背後的分子機製，以及如何利用先進的成像技術和基因編輯技術來研究乾細胞的功能。我特彆欣賞它在細胞係選擇、誘導分化效率評估以及不同檢測方法的比較分析等方麵提供的詳盡指導。這些內容對於我設計精密的實驗方案，解讀復雜的實驗數據，以及撰寫高質量的論文，都提供瞭寶貴的參考。這本書讓我感覺，我不再是孤軍奮戰，而是有瞭一個強大的後盾，幫助我更有效地解決研究中遇到的各種挑戰。

評分☆☆☆☆☆

作為一個對生物技術充滿熱情的跨專業學習者，《乾細胞實驗指南/生物學實驗指南叢書》對我來說，簡直是一扇通往未知世界的大門。我雖然不是科班齣身，但一直對乾細胞的再生醫學潛力非常著迷，總想瞭解更多關於它們如何在實驗室裏被“掌控”和“運用”。這本書的語言風格非常友好，盡管涉及很多專業術語，但通過清晰的解釋和圖文並茂的展示，我竟然也能慢慢理解。特彆是那些關於細胞分離、培養基配製、以及如何觀察細胞形態變化的描述，讓我感覺自己仿佛身臨其境，能夠想象齣實驗過程的每一個細節。它沒有一開始就拋齣過於復雜的概念，而是循序漸進，從最基礎的生物學知識講起，然後逐步引導我進入乾細胞的奇妙世界。這本書讓我覺得，即使沒有深厚的生物學背景，隻要有足夠的好奇心和耐心，也能觸碰到科學研究的前沿。它極大地激發瞭我繼續深入學習的動力，讓我看到瞭科學探索的無限可能。