免疫学技术及其应用/生命科学试验指南系列

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曹雪涛 著
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出版社: 科学出版社
ISBN:9787030273406
商品编码:10067843391
出版时间:2010-11-01

具体描述

作  者:曹雪涛 著作 定  价:138 出 版 社:科学出版社 出版日期:2010年11月01日 装  帧:平装 ISBN:9787030273406 《免疫学技术及其应用》由科学出版社出版。 前言
 单核吞噬细胞
 单核吞噬细胞简介
第二节 单核巨噬细胞的分离
一、人外周血单个核细胞的分离
二、小鼠腹腔巨噬细胞的分离和纯化
三、小鼠肺内巨噬细胞的分离
四、骨髓巨噬细胞的分离和诱导培养
第三节 单核巨噬细胞表型检测
一、直接法流式检测巨噬细胞的表型
二、间接法流式检测巨噬细胞的表型
第四节 巨噬细胞的活化及相关检测
一、巨噬细胞的活化
二、超氧阴离子的检测
三、一氧化氮的检测
第五节 巨噬细胞吞噬和杀伤功能的检测
一、巨噬细胞吞噬鸡红细胞
二、巨噬细胞吞噬FITC标记的细菌
三、巨噬细胞杀伤功能的检测
四、Fc受体介导的吞噬作用
部分目录

内容简介

《免疫学技术及其应用》首先介绍了天然免疫和获得性免疫中免疫细胞(包括单核巨噬细胞、DC、NK、T细胞、B细胞等)、免疫分子(包括抗体、补体、细胞因子、HLA、TLR等)的理论背景和研究方法。然后介绍厂免疫学相关实验技术,如免疫标记技术、流式细胞检测和分选技术、免疫相关分子生物学技术、蛋白质电泳技术、凋亡检测技术等的原理和应用,并融合了免疫学*新前沿技术,如RNA干扰技术、miRNA技术、蛋白质相互作用、BIAcore技术、激光扫描共聚焦显微镜技术、动物疾病模型、转基因动物等。全书理论性、实用性和前沿性紧密结合,在阐述免疫学基本技术、经典实验的同时,更注重免疫学技术的*新发展与在实际科研工作中的合理应用。《免疫学技术及其应用》贯穿理论联系实际的原则,力求原理清晰、简明规范、通俗易懂、要点突出、指导性强,强调实验的影响因素和关键的注意事项,以减少读者在实验方法选择上的失误和操作上的差错。《免疫等     、免疫酶技术的原理
    20世纪中期,以放射免疫技术为代表的各种标记免疫技术相继问世,主要原理是将某种可微量或超微量测定的物质(如酶、放射性核素、荧光素、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物,加入到抗原(抗体)的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应,通过检测标记物的有无及含量而间接反映被检测物的存在与多少。这种将标记技术与抗原抗体反应结合起来的免疫学检测技术以其敏感性高、准确性好、操作简便、易于商品化和自动化等特点逐渐广泛应用于抗原、抗体、补体、免疫细胞、细胞因子等免疫相关物质的检测,也用于酶、微量元素、激素、微量蛋白等体液中各种微量物质的检查。其中,免疫酶技术作为经典的三大标记技术(荧光抗体技术、放射免疫分析和免疫酶技术)之一,在免疫学、医学及其他相关学科的研究中得到*为广泛的应用并等

好的,这是一本关于《分子生物学实验技术与应用》的图书简介,内容详实,完全不涉及您提供的“免疫学技术及其应用/生命科学试验指南系列”中的任何信息。 --- 分子生物学实验技术与应用 生命科学探索的基石与前沿 图书简介 在当代生命科学研究领域,分子生物学无疑是驱动创新的核心引擎。从理解基因的结构与功能,到解析复杂的生命调控网络,再到开发新型的生物技术和药物,所有这些突破都建立在扎实的分子生物学实验技术基础之上。《分子生物学实验技术与应用》旨在为广大生命科学专业的学生、科研工作者以及实验室技术人员提供一本内容全面、技术详尽、注重实践指导的权威参考书。 本书超越了传统教科书对理论概念的罗列,而是聚焦于“如何做”和“为什么这样做”,系统地梳理和深入剖析了分子生物学领域最常用、最核心、以及最具前沿性的实验方法。全书结构清晰,逻辑严谨,力求将复杂的实验流程和背后的科学原理完美结合,使用户能够高效、准确地设计、执行并解读实验结果。 第一部分:分子生物学实验的基石——核酸操作技术 本部分是全书的基础,详细介绍了处理和分析遗传物质——DNA和RNA所需的关键技术。 1. 核酸的提取、纯化与定量: 详细阐述了从不同生物材料(如细菌、酵母、植物组织和哺乳动物细胞)中高效提取高质量基因组DNA、质粒DNA和总RNA的方法。重点探讨了酚氯仿抽提、硅胶柱吸附法的优化策略,并对紫外分光光度法(NanoDrop)和荧光定量法(Qubit)在浓度和纯度评估中的应用差异进行了深入比较和实操指导。 2. 聚合酶链式反应(PCR)及其变体: PCR技术是分子生物学中的“瑞士军刀”。本书不仅详述了标准PCR的反应体系优化(如引物设计原则、酶的选择、退火温度的确定),还重点介绍了实时荧光定量PCR (qPCR) 在基因表达水平分析中的应用,包括$C_t$值、溶解曲线分析及绝对/相对定量方法的严格操作规程。此外,对反转录PCR (RT-PCR) 和高保真PCR技术也进行了详尽的图文解析。 3. 核酸的电泳、分离与分析: 详细介绍了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的分离原理、操作技巧与常见问题排除。对于DNA测序前后的凝胶纯化、DNA片段的回收技术(如胶回收法和寡核苷酸纯化)给出了明确的步骤指导。 4. 基因克隆技术: 这是分子生物学研究的核心环节。本书系统梳理了传统限制性内切酶/连接酶克隆法、限制性位点缺失克隆的精确操作,并着重介绍了现代高效克隆技术,如Gibson组装法和Gateway克隆系统。对于载体(表达载体、报告基因载体)的选择、构建和转化过程中的关键步骤进行了细致讲解。 第二部分:蛋白质组学的技术引擎——蛋白质操作与分析 生命活动的执行者是蛋白质,本部分聚焦于蛋白质的制备、修饰和功能分析技术。 1. 蛋白质的提取、溶解与定量: 针对不同细胞类型(如膜蛋白、核蛋白)的溶解性挑战,提供了多样的裂解缓冲液配方与优化策略。重点讲解了Bradford法、Lowry法及BCA法的适用范围和干扰因素分析。 2. 蛋白质的电泳与印迹分析: 深入剖析了SDS-PAGE的分离机制,并详细指导了Western Blotting的全流程,包括转膜条件的优化(湿转与半干转)、一抗二抗的选择与孵育策略,以及化学发光、荧光检测等信号捕获方法。对iTRAQ、TMT等相对定量蛋白质组学方法的基础概念也有所涉及。 3. 蛋白质互作研究技术: 系统介绍了研究蛋白质间和蛋白质与核酸间相互作用的经典方法。酵母双杂交(Y2H) 的实验设计与假阳性/假阴性排除,免疫共沉淀(Co-IP) 的条件筛选,以及Pull-down实验的原理与操作细节均有详尽阐述。 4. 蛋白质的纯化与鉴定: 从实验室规模到中试规模,本书对亲和层析(Affinity Chromatography)、离子交换层析(IEC)和凝胶过滤层析(SEC)的原理、柱的选择及洗脱梯度设计提供了实用的操作指南。 第三部分:基因功能研究的前沿技术与应用 本部分涵盖了当前研究热点中,用于调控和解析基因功能的高级技术。 1. 基因过表达与干扰技术: 详述了利用腺病毒、慢病毒等载体构建稳定或瞬时过表达系统的操作规程。在RNA干扰(RNAi) 方面,重点讲解了siRNA和shRNA的设计原则、转染效率的评估,以及对基因敲低效果的准确验证。 2. CRISPR-Cas9基因编辑系统: 深度解析了CRISPR-Cas9系统的作用机制,并提供了构建sgRNA文库、细胞转染/电穿孔、同源重组修复(HDR)指导的详细流程。特别关注了脱靶效应的检测与最小化策略。 3. 细胞水平的分子成像: 介绍了荧光原位杂交(FISH)用于定位核酸的技术,以及基于免疫荧光(IF)和共聚焦显微镜技术研究蛋白质的细胞内定位与动态变化的方法。对荧光染料的特性选择和图像采集优化给出了专业建议。 4. 生物信息学初步整合: 鉴于现代实验数据处理的复杂性,本书在关键章节后附录了如何利用公共数据库(如NCBI, Ensembl)进行引物设计验证、序列比对、以及初步的基因表达数据分析的入门指导,强调实验设计必须与数据分析紧密结合。 本书的特色与优势 实践导向的深度解析: 每个实验方法都包含了“理论基础—试剂准备—详细步骤—结果判读—常见问题与解决方案”的完整模块,确保读者能够快速上手。 优化与改进: 汇集了近年来领域内公认的实验优化方案和“秘诀”,有效提高了实验的成功率和可重复性。 安全性与规范性: 强调了生物安全规范(BSL-1至BSL-2操作),试剂的储存与废弃物处理的行业标准。 图表丰富: 大量使用流程图、清晰的电泳照片和优化的反应体系配比图,极大地增强了学习的直观性。 《分子生物学实验技术与应用》不仅仅是一本实验手册,更是科研人员在分子尺度探索生命奥秘的得力助手,是连接基础理论与尖端科研成果之间的坚实桥梁。

用户评价

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这本书的内容实在是太深入浅出了!作为一名对免疫系统充满好奇但又缺乏专业背景的读者,我一直觉得免疫学是一个既迷人又令人望而生畏的领域。很多科普读物要么过于简化,忽略了背后的科学原理,要么过于学术,充斥着我看不懂的专业术语。但这本书,简直就是为我量身定做的!作者似乎深谙如何将复杂的概念分解成易于理解的图示和生动的比喻。例如,当描述抗体与抗原的结合时,作者用了一个非常形象的“钥匙与锁”的比喻,瞬间就让我明白了那种高度特异性的识别过程。而且,书中对于各种免疫细胞的功能,也用非常贴切的比喻来形容,比如巨噬细胞就像是身体里的“清洁工”,时刻清理着“垃圾”。更让我惊喜的是,这本书并没有止步于理论的讲解,而是紧密结合了“试验指南”这个副标题,详细介绍了许多经典的免疫学实验技术。虽然我目前还没有机会亲自操作这些实验,但通过书中细致的步骤讲解和注意事项的提示,我仿佛已经站在了实验室里,亲手操作着离心机,配置着试剂。每一个实验都配有清晰的流程图和预期结果的描述,这让我对这些技术的原理和实际应用有了更直观的认识。读完之后,我对免疫学基本概念的掌握程度有了质的飞跃,而且也对未来可能进行的实验充满了信心。

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我是一名刚入行的科研助理,这本书对我来说,简直是“及时雨”。在实验设计和数据分析方面,我常常感到力不从心。而这本书,恰恰解决了我的痛点。《免疫学技术及其应用》不仅仅是一本“技术手册”,它更像是一位经验丰富的导师,手把手地教我如何将理论知识转化为实际的实验操作,并如何解读实验结果。书中对于各种免疫学实验的“为什么”和“怎么做”都解释得非常到位。比如,在描述Western Blot技术时,作者不仅仅是列出了每一步的操作,还解释了为什么需要特定的封闭液,为什么要选择特定的抗体,以及如何避免常见的实验错误。这些细节的讲解,对于保证实验的成功率和数据的可靠性至关重要。更让我受益匪浅的是,书中关于数据解读和结果分析的部分。例如,在讲解ELISA实验时,书中提供了如何绘制标准曲线、如何计算样品浓度的方法,以及如何识别假阳性或假阴性结果。这些实用的技巧,极大地提升了我独立完成实验和初步分析数据的能力。这本书就像一本“随身携带的实验宝典”,让我能够更加自信地投入到科研工作中。

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这本书简直就是一本“免疫学的百科全书”,而且是那种你愿意反复翻阅、细细品读的百科全书。我一直对免疫学的某个特定领域(比如疫苗开发)非常感兴趣,但市面上关于这方面的书籍要么过于狭窄,要么过于宏观。这本书的出现,正好弥补了这一空白。它在讲解基础免疫学概念的同时,又详细地介绍了与这些概念相关的各种技术手段,并且通过“应用”这个角度,将这些技术与实际的科学研究和医学发展紧密联系起来。例如,当我在阅读关于抗体疗法的章节时,书中不仅解释了抗体是如何工作的,还详细介绍了制备单克隆抗体、抗体人源化等关键技术。这些技术细节的讲解,对于我理解抗体药物的研发过程至关重要。更让我印象深刻的是,书中对于一些前沿研究领域的介绍,也丝毫不含糊。比如,在提及肿瘤免疫治疗时,书中不仅介绍了PD-1/PD-L1抑制剂等概念,还顺带讲解了相关的免疫组化、流式细胞术等检测技术,让我能够更全面地理解肿瘤免疫治疗的原理和评估方法。这本书的知识密度很高,但由于结构清晰,逻辑严谨,所以即使内容庞杂,也不会让人感到混乱。

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这是一本让我重新认识“技术”二字的科普读物。我一直以为技术是冰冷、机械的,是需要高深专业知识才能触及的。然而,《免疫学技术及其应用》彻底颠覆了我的认知。这本书让我看到了科学技术背后的人文关怀和创新精神。它不仅仅是罗列各种实验步骤和仪器名称,更重要的是,它在讲述技术的同时,也在讲述技术背后所解决的科学问题,所带来的社会价值。例如,在介绍PCR技术时,作者并没有仅仅停留在“DNA扩增”这个概念上,而是详细阐述了这项技术是如何在疾病诊断、法医鉴定甚至演化生物学研究中发挥着至关重要的作用。读到这些应用案例,我才真正体会到,这些看似抽象的技术,竟然能如此深刻地影响我们的生活,解决现实世界中的种种难题。书中对于某些实验技术的历史演变和发展脉络也有涉及,让我了解到这些技术并非一蹴而就,而是无数科研人员不断探索、迭代优化的结果。这种对技术背后故事的挖掘,让我对科学研究充满了敬意。而且,书中关于技术操作的细节描述,非常严谨,也很有条理,即使是初学者也能从中获得很多启发。

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这本书的阅读体验,可以用“沉浸式”来形容。它不仅仅是在传递知识,更是在引导读者进行一次深入的探索。我特别喜欢书中对于“为什么”的追问。很多时候,我们在学习一项技术时,只知道怎么做,却不知道为什么这样做。而这本书,总是在关键的地方插入一些关于技术原理和科学背景的解释,让我能够知其然,更知其所以然。例如,在讲解流式细胞术时,作者不仅仅是介绍了细胞染色的过程,还详细解释了荧光染料的工作原理,以及不同滤光片的用途。这种对底层逻辑的梳理,让我对这项技术有了更深刻的理解。而且,书中对于不同技术之间的联系和比较,也做得非常出色。它会告诉你,当遇到某种问题时,可以考虑使用哪种技术,以及不同技术在解决同一问题时的优劣势。这种“全景式”的视角,让我能够更灵活地运用所学的知识。此外,书中还穿插了一些与时俱进的研究案例,让我看到了免疫学技术在解决当前重大科学挑战中的应用前景,这无疑极大地激发了我对免疫学研究的热情。

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