這些說明瞭caspase8和FADD在DHA誘導的Jurkat細胞死亡中是不必要的。caspase-8不敏感的Jurkat細胞中凋亡反應的輕微減少可能反映綫粒體通過caspase-8減弱瞭凋亡信號在下遊的放大(圖1C)。泛caspase抑製劑zVAD -fmk的增加取消瞭DHA誘導的caspase-3活化和細胞核碎片化,說明caspase活化對於DHA誘導的細胞死亡是必須的。然而,一個基本的PARP水平差距還是能在zVAD –fmk處理的樣品中檢測到,尤其是在FADD不敏感的A3細胞中(圖1D,補充圖S2B)。因為zVAD –fmk的存在也觸發瞭Hoechst 33342 PI染色樣品中壞死核的齣現(圖1D)。這些殘餘的PARP差異可能是誘發壞死的結果。
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評分好。。。。。。。。。。。
評分有趣的是,20和40微摩每升的DHA在caspase-9 DN細胞中引起的一個與caspase-3無關的PARP差異和壞死(圖2B和C)。我們因此檢測瞭DHA是否能激活PARP和AIF依賴的程序性壞死。在這個途徑中,AIF通過一個從全長的AIF成為一個縮短到57Kda的蛋白質的蛋白水解的過程而從綫粒體中釋放齣來。然而,用40微摩每升的DHA處理caspase- 9 DN Jurkat 細胞不會增加細胞中縮短的AIF水平,反對著與caspase-3無關的caspase-9 DN Jurkat細胞中程序性壞死的機製。
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