编辑推荐
该书包括如下内容:质粒DNA分离纯化的原理和操作技能; DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理和操作步骤; DNA限制性内切酶的作用原理和DNA酶切的操作技能; DNA割胶回收、纯化的基本原理和操作步骤; T4 DNA 连接酶的作用机理以及DNA 连接的操作方法;感受态细胞的概念、感受态细胞制备和质粒转化的操作步骤; PCR 的基本原理和操作技能;动植物组织DNA的提取的基本原理和操作步骤;动植物组织总RNA提取的基本原理和操作步骤; RT-PCR的基本原理和操作技能;Southern blot、Northern blot、SDS-PAGE、 Western blot的原理和操作步骤;基因的原核表达等内容。
内容简介
吴建祥、李桂新主编的这本《分子生物学实验》共14章,内容涉及质粒DNA的分离、纯化和鉴定,DNA的琼脂糖凝胶电泳和RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳,质粒DNA的限制性酶切鉴定、割胶回收与纯化,特异DNA片段与载体的连接反应,大肠杆菌感受态细胞的制备及连接产物的转化、鉴定,PCR扩增技术,基因组DNA的提取,动植物总RNA的提取,RT-PCR技术,蛋白质的SDS-PAGE电泳及Western blot分析,核酸杂交技术,RELP和RAPD技术,基因的原核表达技术,酶联免疫吸附测定试验等。
本书可供生物技术、分子生物学、生物化学、生物物理学、微生物学、遗传学、医学及农业院校各专业的大学生、研究生、教师、科研人员及从事基因工程技术人员等作为分子生物学技术的教学用书和实验手册。
目录
第一章 质粒DNA的分离、纯化和鉴定
第一节 概述
第二节 碱法提纯质粒DNA
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三节 Axygen质粒提取试剂盒提纯质粒DNA
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第四节 离心机的使用及注意事项
一、离心机的使用步骤
二、离心机使用的注意事项
第二章 DNA琼脂糖凝胶电泳和RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳
第一节 概述
第二节 DNA的琼脂糖凝胶
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三节 RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三章 质粒DNA的限制性酶切鉴定、割胶回收与纯化
第一节 概述
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
三、试剂
第三节 操作步骤
一、酶切反应
二、酶切产物的电泳分离和鉴定
三、酶切产物的割胶回收
四、注意事项
第四章 特异片段与载体的连接反应
第一节 概述
一、带有非互补粘性末端DNA片段的连接
二、带有相同粘性末端DNA片段的连接
三、带有平末端DNA片段的连接
四、适当改造的DNA片段的连接
五、PCR介导的DNA片段的连接
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
三、试剂
第三节 操作步骤
一、外源片段和pMDl8-T载体的连接反应(10μl体系)
二、外源片段和质粒载体的连接反应(10μl体系)
三、注意事项
第五章 大肠杆菌感受态细胞的制备及连接产物的转化、鉴定
第一节 概述
一、大肠杆菌感受态绀胞的制备
二、影响细菌转化效率的因素
三、转化子的鉴定
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
……
第六章 PCR扩增技术
第七章 基因组DNA的提取
第八章 动植物总RNA的提取
第九章 RT-PCR技术
第十章 蛋白质的SDS-PAGE电泳及Western blot分析
第十一章 核酸分子杂交技术
第十二章 RFLP和RAPD技术
第十三章 蛋白的原核表达技术
第十四章 酶联免疫吸附试验
附录
参考文献
前言/序言
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学问对人们要求最大的紧张和最大的热情。巴甫攀登科学文化的高峰,就要冲破不利条件限制,利用生活所提供的有利条件,并去创造新的条件。高士其
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