核酸提取與純化實驗指南

核酸提取與純化實驗指南 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

馬文麗,石嶸 編
圖書標籤:
  • 核酸提取
  • 核酸純化
  • 分子生物學
  • 生物化學
  • 實驗指南
  • 生物技術
  • DNA提取
  • RNA提取
  • 實驗室技術
  • 科研方法
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齣版社: 化學工業齣版社
ISBN:9787122147516
版次:1
商品編碼:11082125
包裝:平裝
叢書名: 生物實驗室係列
開本:16開
齣版時間:2012-01-01
頁數:153

具體描述

內容簡介

核酸是遺傳信息的攜帶者,是基因錶達的物質基礎,是分子生物學研究的主要對象。無論是進行核酸的結構還是功能研究,首先都需要對核酸進行提取和純化。
《核酸提取與純化實驗指南》根據近幾年核酸提取與純化技術的發展現狀組織編寫,內容涵蓋動物、植物、細菌、病毒和其他核酸提取與純化技術。全書內容新、技術全、操作性強,具有較好的可讀性、實用性。
《核酸提取與純化實驗指南》可供遺傳學、分子生物學、醫學基礎等專業的研究生、高年級本科生以及相關研究人員閱讀參考。

目錄

第一章 概述
第一節 核酸提取與純化的曆史
第二節 核酸提取與純化的現狀
一、當前核酸提取與純化的應用領域
二、當前核酸提取與純化的常見方法
三、核酸提取與純化存在的問題和解決方法
參考文獻
第二章 動物核酸的提取與純化
第一節 概述
第二節 動物基因組DNA的提取與純化
一、動物組織材料的預處理
二、DNA提取的預處理
三、DNA提取的方法
四、DNA的純化方法
五、DNA的檢測和鑒定
第三節 動物RNA的提取與純化
一、動物總RNA的提取與純化
二、動物mRNA的提取與純化
三、動物microRNA的提取與純化
參考文獻
第三章 植物核酸的提取與純化
第一節 概述
一、應用於重要農藝性狀功能基因的分離
二、應用於農業基因組學
三、應用於植物轉基因技術及其改良品種
四、應用於植物染色體工程技術
五、應用於植物次生代謝産物的生産
六、應用於植物DNA分子標記輔助育種
七、應用於轉基因食品的檢測
第二節 植物基因組DNA的提取與純化
一、植物組織材料的預處理
二、植物基因組DNA的提取
三、植物基因組DNA的純化
四、植物基因組DNA的檢測
第三節 植物RNA的提取與純化
一、植物總RNA的提取與純化
二、植物mRNA的提取與純化
三、植物microRNA的提取與純化
四、植物RNA的檢測
參考文獻
第四章 細菌核酸的提取與純化
第一節 概述
第二節 細菌基因組DNA的提取與純化
一、細菌基因組DNA小量製備
二、氯化銫法大規模製備細菌基因組DNA
三、細菌基因組DNA提取試劑盒(溶液法)
四、提取基因組DNA注意事項
五、基因組DNA鑒定
六、DNA的純化
第三節 細菌RNA的提取與純化
一、從革蘭氏陰性細菌中分離高質量的RNA
二、從革蘭氏陽性細菌分離RNA
三、從革蘭氏陰性細菌中快速分離RNA
四、細菌RNA提取試劑盒
參考文獻
第五章 病毒核酸的提取與純化
第一節 概述
一、病毒的大小和形態
二、病毒的結構及化學組成
三、病毒的分類
四、病毒的復製過程
五、病毒純度的標準
六、病毒提純的一般原則
七、病毒核酸的應用領域和提取方法指導
第二節 病毒DNA的提取與純化
一、病毒DNA單鏈及雙鏈特點
二、具體的實驗方法
三、檢測和鑒定
第三節 病毒RNA的提取與純化
一、病毒RNA的提取
二、具體的實驗方法
三、檢測和鑒定(電泳鑒定)
參考文獻
第六章 其他核酸的提取與純化
第一節 綫粒體DNA與葉綠體DNA的提取與純化
一、綫粒體DNA的提取與純化
二、葉綠體DNA的提取與純化
第二節 質粒DNA的提取與純化
一、質粒DNA的小量提取與純化
二、質粒DNA的大量提取與純化
第三節 DNA片段的提取與純化
一、酶切片段的提取和純化
二、小片段DNA的提取和純化:PCR産物等的提取純化
三、cDNA的提取和純化
四、帶特殊標記的DNA的提取和純化
第四節 其他RNA的提取與純化
一、核糖體RNA的提取與純化
二、RNA探針的提取和純化
參考文獻

前言/序言

序言
21世紀是生命科學的世紀,這已成為人們的共識。
生命科學隨著人類對自身和自然的認識、探索而萌芽,隨著人類生産和科學實踐的進步而發展。現代生命科學包括生物學、醫學、農學等傳統學科領域,以及生物學、生物技術與環境科學乃至社會科學等其他學科相互滲透、交叉而産生的新型學科體係。20世紀後葉,現代生物科學尤其是分子生物學取得瞭一係列突破性成就,使得生命科學在自然科學體係中的位置發生瞭革命性的變化,成為21世紀的帶頭學科。人們對生命科學也寄予瞭無限的期望,希望能夠解決人類社會所麵臨的人口膨脹、資源匱乏、疾病危害、環境汙染和生態破壞等一係列重大問題。
迴顧生命科學的發展曆程,實驗技術一直起著非常重要的促進作用。如17世紀Leeuwenhoek等人發明並應用顯微鏡技術,直接催生瞭“細胞學說”的建立和發展;1973年Cohn和Boyer完成瞭DNA體外重組實驗,標誌著基因工程的肇始;1988年KaryMullis發明的PCR技術甚至使生命科學産生瞭飛躍性的發展。可以說,生命科學每時每刻離不開實驗,實驗是開啓神奇的生命王國大門的鑰匙。沒有實驗技術的不斷進步,也就沒有生命科學今天的巨大發展;同時,生命科學的發展又對實驗技術提齣瞭更高的要求,進一步刺激瞭後者的不斷進步。生命科學正是在“實驗催生和驗證著基礎理論,理論指導和發展瞭實驗技術”的不斷循環中從必然王國走嚮自由王國。
工欲善其事,必先利其器。為瞭有助於生命科學工作者更多地瞭解相關實驗技術和儀器設備,更好地設計實驗方案,更有效地開展實驗過程,更閤理地處理實驗結果,化學工業齣版社組織齣版瞭《生物實驗室係列》圖書。係列圖書在整體規劃的基礎上,本著“經典、前沿、實用,理論與技術並重”的原則組織編寫,分批齣版。
在題材上,係列圖書涵蓋綜閤實驗技術和單項實驗技術兩個方麵。其中綜閤實驗技術既有以實驗目的為題,如“蛋白質化學分析技術”,內容縱嚮覆蓋多項實驗技術;也有以某一生命學科領域的綜閤實驗技術為題,如“發酵工程實驗技術”、“生物化學實驗技術”等。而單項實驗技術則以深入介紹某一專項技術及其應用為主,在闡述其基本原理的基礎上,橫嚮介紹該項技術在多個領域的應用,如“雙嚮電泳技術”、“流式細胞術”等。
在內容上,係列圖書主要有以下兩個顯著特點。一是強調先進性——除瞭係統介紹常用和經典實驗技術以外,特彆突齣瞭當前該領域實驗手段的新理論、新技術、新發展,為國內專業人員起到藉鑒和引導作用。二是強調可操作性——對於每一項實驗技術,係統介紹其原理方法、設備儀器和實驗過程,讓讀者明瞭實驗的目的、方案設計以及具體步驟和結果處理,以期起到實驗指南的作用。
本係列圖書堅持質量為先,開拓國內和國際兩個齣版資源。一方麵,邀請國內相關領域兼具理論造詣和豐富實驗室工作經驗的專傢學者編著;另一方麵,時刻關注國際生命科學前沿領域和先進技術的進展,及時引進(翻譯或影印)國外知名齣版社的權威力作。
《生物實驗室係列》圖書的讀者對象設定為國內從事生命科學及生物技術和相關領域(如醫學、藥學、農學)的專業研究人員,企業或公司的生産、研發、管理技術人員,以及高校相關專業的教師、研究生等。
我們殷切希望《生物實驗室係列》圖書的齣版能夠服務於我國生命科學的發展需要,同時熱忱歡迎從事和關心生命科學的廣大科技人員不僅對已齣版圖書提供寶貴意見和建議,也能對係列圖書的後續題目設計貢獻良策或推薦作者,以便我們能夠集思廣益,將這一係列圖書沿著可持續發展的方嚮不斷豐富品種,推陳齣新。
謹嚮所有關心和熱愛生命科學,為生命科學的發展孜孜以求的科學工作者緻以崇高的敬意!
祝願我國的科技事業如生命之樹根深葉茂,欣欣嚮榮!
化學工業齣版社生物·醫藥齣版分社
生物技術前沿:現代分子生物學技術與應用 書籍簡介 本書旨在為分子生物學領域的研究人員、技術人員以及高年級本科生和研究生提供一本全麵、深入且極具實踐指導意義的參考書。不同於側重單一實驗步驟的指南,本書構建瞭一個涵蓋分子生物學核心技術體係的宏大框架,重點聚焦於技術原理的深入解析、最新方法的迭代發展,以及復雜實驗設計與數據解讀的綜閤策略。 本書內容緊密圍繞分子生物學的基石——核酸、蛋白質及其相互作用的研究展開,係統性地介紹瞭從樣本製備到高級功能研究的全流程技術鏈條。 --- 第一部分:分子生物學基礎與樣本製備的藝術 本部分奠定瞭後續所有實驗操作的物質基礎,強調瞭樣本質量對實驗結果的決定性影響。 第一章:分子生物學研究的倫理與安全規範 詳細闡述瞭實驗室生物安全等級(BSL)標準,化學試劑的正確處理與廢棄流程,以及基因操作的生物安全考量。重點解析瞭現代實驗室管理體係中對數據完整性和可追溯性的要求。 第二章:生物大分子樣本的采集、穩定與預處理 深入探討瞭不同組織來源(植物、動物、微生物)的樣本采集時機、保存介質(如RNAlater、不同濃度的福爾馬林)的選擇標準及其對後續分子完整性的影響。詳細對比瞭快速冷凍法、液氮研磨法、勻漿法等多種組織勻漿技術,並分析瞭不同方法對細胞器膜結構破壞程度的差異,這直接關係到後續提取的效率和純度。 第三章:高效分離與初步純化技術精要 這一章聚焦於宏觀的分離技術,而非微觀的提取過程。涵蓋瞭差速離心法在分離細胞器(如綫粒體、核)中的應用,密度梯度離心(如Percoll或蔗糖梯度)用於亞細胞組分的精確分離。此外,還包括瞭對特定組織或細胞群進行富集的流式細胞術(FACS)的基礎原理及其在下遊分析前的樣本預處理要求。 --- 第二部分:基因組學與轉錄組學的核心技術鏈條 本部分聚焦於DNA和RNA的檢測、擴增、定量及測序準備,是現代生命科學研究的支柱。 第四章:核酸分析與定量:超越傳統方法的限製 本書對傳統瓊脂糖凝膠電泳的原理進行瞭詳盡的物理化學闡釋,並深入分析瞭影響遷移速度的電場強度、緩衝液離子強度和分子構象(綫性、環狀、超螺鏇)的相互作用。著重介紹瞭高靈敏度的熒光定量分析技術(如NanoDrop與Qubit平颱),並詳細對比瞭它們在測定核酸純度(A260/A280, A260/A230比值)和絕對濃度時的適用場景與局限性。 第五章:聚閤酶鏈式反應(PCR)的深度優化與變體 不僅復述瞭標準PCR的步驟,更側重於高級PCR技術的精確控製。詳細講解瞭實時熒光定量PCR(qPCR)中各種檢測模式(TaqMan探針、SYBR Green)的熒光信號産生機製、溶解麯綫分析在區分特異性産物中的作用,以及如何通過熔解麯綫分析來排除引物二聚體。對高保真DNA聚閤酶的結構特性和應用限製進行瞭深入討論。 第六章:下一代測序(NGS)文庫構建的精密工程 本章是本書的重點之一,全麵覆蓋瞭從DNA/cDNA片段化到接頭連接的整個文庫製備流程。詳細分析瞭不同片段化技術(酶切法、超聲波破碎法)對片段大小分布的影響。對於RNA測序,區分瞭基於Poly(A)富集、核糖體RNA去除和全長RNA測序在文庫設計上的核心差異,並強調瞭去除PCR偏好性、優化PCR循環數以減少GC偏倚的策略。 第七章:分子剋隆學:載體設計與高效轉化 深入探討瞭質粒載體的拓撲結構、抗性標記、復製起點(Ori)的選擇對細胞宿主篩選的影響。詳細對比瞭限製性內切酶“粘性末端”與“平末端”操作的技術要點,以及使用Gibson Assembly、SLIC等無縫剋隆技術時的緩衝區優化要求。著重介紹瞭不同宿主細胞(大腸杆菌、酵母、哺乳動物細胞)的高效轉化(感受態製備與電穿孔參數設置)的技術訣竅。 --- 第三部分:蛋白質組學與功能分析的技術前沿 本書將視角從核酸擴展到蛋白質層麵,探討如何解析生命體的分子執行者。 第八章:蛋白質的分離與分離基礎 係統介紹瞭SDS-PAGE和非變性PAGE的電泳原理,重點分析瞭變性劑(SDS、尿素)和還原劑(DTT、β-巰基乙醇)濃度對蛋白質二級結構解析的影響。對於2D-PAGE,詳細闡述瞭等電聚焦(IEF)的pH梯度設置與蛋白質遷移的等電點關係。 第九章:免疫學檢測技術的深度應用 詳細講解瞭Western Blotting中的抗體選擇、一抗二抗孵育條件的優化(如稀釋度、封閉液的種類選擇),以及化學發光與熒光檢測係統的靈敏度對比。此外,還收錄瞭ELISA(酶聯免疫吸附測定)在定量分析中的麯綫擬閤方法與質量控製(QC)標準。 第十營:蛋白質相互作用組(PPI)的研究方法 本書不局限於傳統的雙擊閤實驗(Y2H),而是深入探討瞭體內共免疫沉澱(Co-IP)的條件優化,如選擇閤適的溫和洗脫緩衝液以維持弱相互作用。對於體內實驗,則詳細介紹瞭報告基因檢測係統(如Luciferase Reporter Assay)的定量校準流程。 第十一章:細胞內定位與分子成像技術 聚焦於如何利用熒光標記技術確定蛋白質的亞細胞定位。詳細介紹瞭綠色熒光蛋白(GFP)及其變體的光穩定性、成熟時間等特性。講解瞭共聚焦顯微鏡的關鍵參數設置(如針孔大小、Z軸掃描),以有效減少焦平麵外信號的乾擾,實現高分辨率的三維重構。 --- 第四部分:實驗數據的分析、整閤與高級策略 本書強調,實驗的終點是數據,而數據的意義依賴於正確的解讀。 第十二章:生物信息學初步:從原始數據到結果可視化 本章為分子生物學研究者提供瞭必要的數據處理工具箱。介紹瞭常用的序列比對工具(如BLAST)的參數設置意義,基因錶達數據(如RNA-seq)的標準分析流程(包括質量控製、比對、定量及差異錶達分析的基礎概念)。強調瞭統計學在生物學實驗中的重要性,如t檢驗、ANOVA的應用邊界及多重檢驗校正方法(如FDR)。 第十三章:復雜實驗設計與係統性故障排除 提供瞭一套係統的實驗設計思維框架,教授讀者如何構建有效的對照組(陰性、陽性、試劑對照),以及如何進行預實驗以確定最佳的反應體係。書中收集瞭數百個常見實驗失敗案例,並從“試劑”、“設備”、“操作”三個維度進行係統性的故障排查指導,如“為什麼我的PCR擴增效率低?”、“為什麼我的蛋白質印跡背景過高?”等實際問題。 本書力求成為分子生物學領域研究人員手中一部兼具理論深度與操作實用的“技術寶典”,是實現高水平科研産齣的堅實技術保障。

用戶評價

評分

我是一名在讀的博士生,之前做實驗基本都是跟著師兄師姐留下的筆記,雖然也能勉強進行,但總覺得缺乏係統性,而且對一些細節的理解不夠深入。拿到《核酸提取與純化實驗指南》這本書後,我發現它完全超齣瞭我的預期。這本書不僅僅是告訴你“怎麼做”,更重要的是它深入淺齣地解釋瞭“為什麼這麼做”。例如,在討論酚氯仿抽提法時,它不僅給齣瞭詳細的步驟,還詳細解釋瞭酚和氯仿如何溶解脂質和蛋白質,以及如何通過離心分離齣核酸。對於RNA提取中的DEPC水處理,書中也給齣瞭充分的理由和必要性。更讓我驚喜的是,這本書還涉及瞭一些高級的應用,比如如何在提取過程中避免內源性核酸酶的降解,以及如何處理一些特殊的樣本,比如土壤樣本或糞便樣本,這些在我的日常實驗中雖然不常用,但瞭解它們有助於拓寬我的實驗視野。這本書的語言嚴謹又不失生動,即使是一些比較枯燥的原理,讀起來也不會覺得乏味。總的來說,這本書不僅能夠滿足我作為一名科研人員在核酸提取純化方麵的基本需求,更能幫助我提升實驗的深度和廣度,讓我在研究中更加遊刃有餘。

評分

我是一位從事多年生物技術研發的資深研究員,在我的職業生涯中,接觸過各種各樣的核酸提取和純化技術。《核酸提取與純化實驗指南》這本書,對於我來說,更多的是一種“查漏補缺”和“鞏固深化”的作用。我發現這本書在一些非常細微之處的處理上,做得相當到位。比如,在討論不同裂解液的配方時,書中會詳細分析各種添加劑(如 SDS、胍鹽、DTT 等)的具體作用,以及它們如何協同作用來達到最佳的裂解效果。對於一些常被忽視的細節,比如離心管的選擇、緩衝液的儲存條件、甚至是操作環境的溫度控製,書中都給予瞭充分的提示。這說明作者在編寫過程中,對實驗的每一個環節都進行瞭深入的思考。另外,書中還對一些新興的核酸提取技術,比如基於微流控技術的提取方法,也有所提及,這讓我能夠及時瞭解行業的前沿動態。總的來說,這本書不僅僅是為初學者量身定做的,對於經驗豐富的研究者來說,它也是一本值得反復研讀的寶典,能夠幫助我們不斷提升實驗的精密度和效率,從而推動科研成果的産齣。

評分

我對這本書的評價是,它就像一本“百科全書”式的實驗指導,能夠滿足不同水平讀者的需求。我是一位剛剛接觸分子生物學領域的醫學研究者,在學習過程中,我經常會遇到一些概念性的問題,比如為什麼需要裂解細胞,為什麼要加入結閤緩衝液,為什麼要用洗滌液等。《核酸提取與純化實驗指南》這本書就很好地解答瞭我的這些疑惑。它在前言部分就對核酸的性質、提取的目的以及純化的重要性做瞭非常詳細的闡述,為我打下瞭堅實的理論基礎。書中在介紹每種提取方法時,都會詳細解釋所用試劑的作用機理,以及每一步操作的科學依據。例如,在使用矽膠膜吸附法提取核酸時,書中會詳細講解在高鹽濃度和特定 pH 條件下,核酸如何與矽膠膜結閤,以及在低鹽或無鹽條件下如何洗脫。這種深入的原理講解,讓我能夠更好地理解實驗過程,而不是僅僅機械地模仿步驟。而且,書中還提供瞭很多實際案例,展示瞭如何根據不同的研究目的(比如基因分型、基因錶達分析、文庫構建等)來優化核酸提取純化方案,這對我後續的研究設計非常有啓發。

評分

我是一名實驗室的管理員,負責管理實驗室的試劑和耗材,同時也需要協助進行一些基礎的實驗操作。對於《核酸提取與純化實驗指南》這本書,我更多的是從實用和標準化的角度去審視它。這本書最大的優點在於它的全麵性和規範性。它包含瞭市麵上主流的核酸提取和純化方法,並且對每種方法的試劑用量、反應時間、離心速度等關鍵參數都給齣瞭明確的建議範圍。這對於我們建立標準化的實驗流程非常有幫助。當有新成員加入實驗室需要進行核酸提取實驗時,我可以直接將這本書作為教材,因為它提供瞭非常清晰的操作 SOP(標準操作規程)。書中的一些錶格,比如不同類型樣本的核酸提取效率對比,以及常見核酸酶的性質和抑製劑,都為我們選擇最經濟高效的實驗方案提供瞭依據。另外,書中還針對不同純化産品的說明書,進行瞭詳細的解讀和比較,這能幫助我們更好地理解和使用各種商品化的試劑盒,避免因誤讀說明書而造成的實驗失敗。這本書的齣版,極大地降低瞭我們在核酸提取純化實驗中的操作門檻,也確保瞭實驗結果的可靠性。

評分

作為一名剛剛入門分子生物學實驗的研究助理,我一直在尋找一本能夠清晰、係統地指導我完成核酸提取與純化這一基礎卻至關重要的實驗的書籍。經過一番比較,我最終選擇瞭《核酸提取與純化實驗指南》。這本書簡直是我的“救星”!它以極其詳盡的步驟,從理論基礎到實際操作,麵麵俱到。比如,書中對於不同樣本類型(如血液、組織、細胞、植物等)的核酸提取方法都進行瞭深入的介紹,並且詳細闡述瞭每種方法的原理,例如有機溶劑法、柱層析法、磁珠法等,並分析瞭它們的優缺點。對於我這樣初學者來說,理解這些原理至關重要,能夠幫助我根據實驗需求選擇最閤適的方法。此外,書中對實驗過程中可能遇到的各種問題,如産量低、純度不高、降解等,都提供瞭非常實用的故障排除指南,並給齣瞭具體的解決方案。讓我印象深刻的是,書中對於試劑的配製、儀器的選擇和使用,甚至是實驗室安全注意事項,都做瞭細緻的說明,幾乎可以說是手把手教學。我還特彆喜歡書中附帶的大量圖示和流程圖,這使得復雜的實驗步驟變得直觀易懂,極大地提高瞭我的學習效率,讓我能夠信心滿滿地投入到實際操作中。

評分

買瞭之後纔感到後悔瞭,書價錢很貴,但是質量一般,還不如買一本分子剋隆呢

評分

太太專業的生物學實驗室指南。

評分

太太專業的生物學實驗室指南。

評分

實驗指導書,做參考,一般

評分

買瞭之後纔感到後悔瞭,書價錢很貴,但是質量一般,還不如買一本分子剋隆呢

評分

買瞭之後纔感到後悔瞭,書價錢很貴,但是質量一般,還不如買一本分子剋隆呢

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實驗指導書,做參考,一般

評分

實驗指導書,做參考,一般

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太太專業的生物學實驗室指南。

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