破坏性蛋白质提取的方法是细胞壁蛋白提取的第二个主要途径,并且这个方法也应用了质壁分离。在用含有甘油和甘露醇的溶液处理拟南芥的悬浮细胞系后,将细胞通过一个N2破碎弹随后细胞碎片被恢复并且通过显微镜检查。从准备的细胞壁材料中用2%的十二烷基硫酸钠(SDS)提取蛋白质并用Western杂交分析污染的胞内蛋白。作为非破坏性的方法,污染是一个重大的问题,因此必须保证细胞壁的纯度。
评分沈世华,中国科学院植物研究所研究员,博士生导师。兼任中国科学院唐山高新技术研发与转化中心工程植物事业部部长,中国植物生理学会植物生物质与生物能源专业委员会委员。
评分破坏性蛋白质提取的方法是细胞壁蛋白提取的第二个主要途径,并且这个方法也应用了质壁分离。在用含有甘油和甘露醇的溶液处理拟南芥的悬浮细胞系后,将细胞通过一个N2破碎弹随后细胞碎片被恢复并且通过显微镜检查。从准备的细胞壁材料中用2%的十二烷基硫酸钠(SDS)提取蛋白质并用Western杂交分析污染的胞内蛋白。作为非破坏性的方法,污染是一个重大的问题,因此必须保证细胞壁的纯度。
评分从5种植物体中提取只含有初生细胞壁的蛋白质[3]是分离和鉴定大量细胞壁蛋白质的尝试之一。通过过滤收集细胞,通过在5种不同的缓冲液中搅拌细胞提取蛋白质。缓冲液包含0.2mol/LCaCl2、50mmol/LCDTA、50mmol/L乙酸钠(pH6.5)、2mmol/L的二硫苏糖醇、1mol/LNaCl和0.2mol/L硼酸,pH7.5,缓冲液用于后续和非后续的提取体系。Blee等[4]采用了同时具有初生细胞壁和次生细胞壁的转化了的烟草的悬浮细胞系作为活细胞直接提取总蛋白的来源。蛋白质提取用0.2mol/LCaCl2、50mmol/LCDTA。
评分 评分生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南 很详细的实验
评分还可以,做这方面研究值得参考
评分从5种植物体中提取只含有初生细胞壁的蛋白质[3]是分离和鉴定大量细胞壁蛋白质的尝试之一。通过过滤收集细胞,通过在5种不同的缓冲液中搅拌细胞提取蛋白质。缓冲液包含0.2mol/LCaCl2、50mmol/LCDTA、50mmol/L乙酸钠(pH6.5)、2mmol/L的二硫苏糖醇、1mol/LNaCl和0.2mol/L硼酸,pH7.5,缓冲液用于后续和非后续的提取体系。Blee等[4]采用了同时具有初生细胞壁和次生细胞壁的转化了的烟草的悬浮细胞系作为活细胞直接提取总蛋白的来源。蛋白质提取用0.2mol/LCaCl2、50mmol/LCDTA。
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