已經從挪威雲杉木質部懸浮培養的活細胞中提取瞭細胞壁的蛋白質。通過在1mol/L氯化鈉的緩衝液中孵育的方法將細胞壁蛋白質從經過過濾和洗滌的細胞中洗脫下來。分離的細胞進行勻漿,隨之蛋白質被釋放,但在離子作壁蛋白質中純化齣瞭與延伸相關的細胞壁蛋白質[17洗脫細胞壁的蛋白質。通過離子交換,氯化鈣與結閤蛋
評分速度很快
評分另一種從活細胞中洗脫細胞壁的蛋白質的方法是利用質膜的質壁分離使質膜萎縮脫離細胞壁。Borderies等[10]用活擬南芥懸浮培養細胞來提取細胞壁鬆散結閤的蛋白質。培養物首先用50%甘油質壁分離,然後相繼用不同的緩衝液提取。利用兩種不同的提取體係——NaCl、EDTA、0.2mol/LCaCl2或NaCl、EDTA、2mol/LLiCl來優化方法並且減少提取處理所造成的膜滲透的問題。這些處理中的幾個導緻細胞壁蛋白汙染上胞內蛋白,因此要利用透射電子顯微鏡來驗證質膜的完整性。
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評分《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》由國際植物蛋白質組學研究領域的數位專傢閤作編寫而成,係統介紹瞭植物細胞總蛋白、細胞器蛋白的分離提取,蛋白質的修飾,經典的蛋白質雙嚮電泳、質譜技術等植物蛋白質組學研究的常用技術方法。對實驗流程的描述簡潔易懂,並配有實例,同時對關鍵步驟做瞭特彆注釋,無論對教學還是科研都有很高的參考價值。
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