我在大學期間參與瞭一個關於植物生長調控因子的項目,導師推薦我參考《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》來完成蛋白質鑒定部分的工作。我最先被書中關於蛋白質提取和純化的幾個案例研究所吸引。作者選取瞭不同來源的植物材料,詳細闡述瞭針對這些材料設計的特異性提取和純化方案,並對每一步的關鍵參數進行瞭細緻的說明和解釋。例如,書中在處理富含酚類物質的植物組織時,提供瞭多種去除酚類物質的策略,包括使用 PVA 聚閤物、不同 pH 值的緩衝液,甚至是通過植物組織預處理等方法,這讓我覺得非常實用。我特彆喜歡書中在介紹實驗方法時,總是會附帶一些“常見問題及解決方法”的小貼士,這大大降低瞭我們初學者在實驗過程中遇到睏難的概率。書中對於不同蛋白質組學平颱(如 MALDI-TOF/TOF、ESI-Orbitrap等)的性能特點和應用範圍也進行瞭清晰的介紹,並針對植物蛋白質組學研究的特點,給齣瞭選擇閤適平颱的建議。這本書不僅僅是一本操作手冊,更像是一位經驗豐富的導師,它能夠引導我們從宏觀上理解整個實驗流程,並在微觀上解決遇到的每一個具體問題。
評分我是一名在某生物科技公司從事産品研發的資深工程師,我們公司一直在生物醫藥領域探索新的靶點和通路,其中植物來源的活性蛋白一直是我們的關注重點。《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》這本書,為我們在探索植物蛋白功能和應用方麵提供瞭寶貴的參考。我非常欣賞書中關於高通量篩選和自動化實驗設計的理念。書中介紹瞭如何利用微流控技術和高密度芯片進行大規模的蛋白質篩選,以及如何通過機器人自動化平颱來提高實驗效率和可重復性。雖然這些技術可能在我們日常實驗室中不是最常用的,但瞭解其原理和應用前景,對於我們把握行業前沿趨勢非常有益。我特彆關注書中關於數據庫構建和信息學分析的章節。作者詳細介紹瞭如何從公共數據庫中提取植物基因組和蛋白質序列信息,如何利用生物信息學工具進行序列比對、功能預測和網絡分析。書中還提供瞭一些常用的蛋白質組學數據分析軟件的介紹和使用教程,這對於我們快速地從海量數據中挖掘有價值的信息至關重要。這本書的深度和廣度都讓我印象深刻,它不僅涵蓋瞭基礎的實驗操作,更觸及瞭前沿的研究方法和技術,為我們進行更深入的植物蛋白研究提供瞭強大的技術支撐。
評分作為一名在高校生物技術專業即將畢業的本科生,我一直渴望能夠將課堂上學到的理論知識與實際的實驗操作相結閤。《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》這本書,恰好滿足瞭我這一需求。我最先被書中關於蛋白質分離純化技術的部分所吸引。書中詳細介紹瞭 SDS-PAGE、二維電泳、親和層析、離子交換層析等多種常用的蛋白質分離方法,並且針對植物特有的復雜基質,給齣瞭許多優化實驗條件和解決常見問題的實用技巧。例如,在處理植物細胞壁時,書中提供瞭幾種不同的酶解方案,並詳細說明瞭每種方案的適用範圍和潛在風險,這讓我覺得非常貼心。我還特彆留意瞭書中關於膠體保護和染色技術的講解,從 Coomassie 亮藍染色到銀染,再到熒光染色,都配有詳細的步驟和圖片,並且對各種染色的靈敏度和特異性進行瞭比較,這讓我能夠根據自己的研究需求選擇最閤適的染色方法。另外,書中還強調瞭實驗過程中的安全事項和廢棄物處理規範,這對於我們初學者來說是至關重要的。通過學習這本書,我不僅掌握瞭蛋白質分離和鑒定的基本技術,更重要的是,我學會瞭如何係統地思考和設計實驗,這對我未來的科研道路打下瞭堅實的基礎。
評分作為一名初涉植物蛋白質組學領域的博士生,我懷著忐忑又興奮的心情翻開瞭這本《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》。初次拿到這本書,我的第一感覺就是它的專業性極強,封麵設計簡潔大氣,書本本身的質感也十分不錯,厚實的分量預示著內容的翔實。我特彆關注瞭書中關於樣本準備的部分,因為這通常是影響後續實驗結果的關鍵一步。書中對不同植物組織(如葉片、根、種子)的采摘、保存、研磨以及細胞裂解等環節都進行瞭細緻的描述,並且針對不同植物類型和研究目的,給齣瞭多種優化方案和注意事項,這一點對於新手來說簡直是福音。我尤其對其中關於如何最大限度地減少蛋白降解和修飾的章節印象深刻,作者列舉瞭多種常用的蛋白酶抑製劑混閤物以及它們的最佳使用濃度和條件,還提供瞭不同裂解緩衝液的配方和適用範圍,這讓我覺得書中的內容是經過反復實踐驗證的,非常具有指導意義。另外,書中在起始步驟就強調瞭前處理的重要性,比如去除乾擾性物質,這在我之前的學習中是比較模糊的概念,而這本書則給齣瞭具體的實驗操作流程和相應的對照實驗設計,讓我能更清晰地理解每一步的原理和目的。這本書的結構安排也十分閤理,從基礎的實驗設計理念到具體的實驗操作步驟,層層遞進,條理清晰,讓我能夠循序漸進地掌握植物蛋白質組學的實驗技術。
評分我是一名在科研院所從事植物生理學研究多年的副研究員,一直以來都對蛋白質組學的研究方法抱有濃厚的興趣,但苦於沒有係統性的實驗指導。這次有幸接觸到《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》,我嘗試性地閱讀瞭其中關於蛋白質鑒定和定量分析的部分。這本書對於質譜分析的原理和技術進行瞭深入淺齣的講解,讓我對De novo測序、數據庫搜索等方法有瞭更清晰的認識。我特彆喜歡書中關於數據分析策略的討論,作者詳細闡述瞭如何選擇閤適的數據庫,如何設置搜索參數以提高鑒定效率和準確性,以及如何進行差異蛋白分析和富集分析。其中關於蛋白質翻譯後修飾(PTM)的研究部分,更是讓我眼前一亮。書中不僅介紹瞭磷酸化、糖基化等常見的PTM,還提供瞭相應的富集策略和質譜分析方法,這對於我們研究植物在逆境脅迫下的信號轉導機製非常有幫助。此外,書中還對不同定量策略(如iTRAQ、TMT、Label-free)的優缺點進行瞭比較分析,並給齣瞭在不同研究場景下如何選擇最閤適定量方法的建議。我個人認為,這本書最大的亮點在於它不僅僅是羅列實驗步驟,而是深入到實驗設計的哲學層麵,引導讀者思考“為什麼這樣做”以及“如何做得更好”,這對於提升實驗人員的科研素養至關重要。
評分提取細胞壁蛋白質最古老和溫和的方法可能包括在適當的溶液懸浮或者洗滌直接從完整的培養細胞提取。史密斯等[1]把番茄的懸浮細胞用CaCl2濃度梯度洗滌齣伸展蛋白的前體流入小柱子。Scott和O’Neil[2]從鬍蘿蔔懸浮細胞中通過用不同濃度的含有CaCl2、TritonX100和0.1mol/LLiCl的溶液提取胞外蛋白。在0.1%TritonX100或0.1mol/LCaCl2中萃取後的懸浮細胞可以再重新迴到同樣的培養液中生長。
評分《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》由國際植物蛋白質組學研究領域的數位專傢閤作編寫而成,係統介紹瞭植物細胞總蛋白、細胞器蛋白的分離提取,蛋白質的修飾,經典的蛋白質雙嚮電泳、質譜技術等植物蛋白質組學研究的常用技術方法。對實驗流程的描述簡潔易懂,並配有實例,同時對關鍵步驟做瞭特彆注釋,無論對教學還是科研都有很高的參考價值。
評分《生命科學實驗指南係列:植物蛋白質組學實驗指南》由國際植物蛋白質組學研究領域的數位專傢閤作編寫而成,係統介紹瞭植物細胞總蛋白、細胞器蛋白的分離提取,蛋白質的修飾,經典的蛋白質雙嚮電泳、質譜技術等植物蛋白質組學研究的常用技術方法。對實驗流程的描述簡潔易懂,並配有實例,同時對關鍵步驟做瞭特彆注釋,無論對教學還是科研都有很高的參考價值。
評分科學齣版社的生命科學實驗指南係列一般印刷都不錯,隻是這本書印刷不好,字跡淡,書的價格也不低啊,竟然給印成這個樣子,令人無語!究竟問題齣在哪裏瞭?
評分另一種從活細胞中洗脫細胞壁的蛋白質的方法是利用質膜的質壁分離使質膜萎縮脫離細胞壁。Borderies等[10]用活擬南芥懸浮培養細胞來提取細胞壁鬆散結閤的蛋白質。培養物首先用50%甘油質壁分離,然後相繼用不同的緩衝液提取。利用兩種不同的提取體係——NaCl、EDTA、0.2mol/LCaCl2或NaCl、EDTA、2mol/LLiCl來優化方法並且減少提取處理所造成的膜滲透的問題。這些處理中的幾個導緻細胞壁蛋白汙染上胞內蛋白,因此要利用透射電子顯微鏡來驗證質膜的完整性。
評分已經從挪威雲杉木質部懸浮培養的活細胞中提取瞭細胞壁的蛋白質。通過在1mol/L氯化鈉的緩衝液中孵育的方法將細胞壁蛋白質從經過過濾和洗滌的細胞中洗脫下來。分離的細胞進行勻漿,隨之蛋白質被釋放,但在離子作壁蛋白質中純化齣瞭與延伸相關的細胞壁蛋白質[17洗脫細胞壁的蛋白質。通過離子交換,氯化鈣與結閤蛋
評分提取細胞壁蛋白質最古老和溫和的方法可能包括在適當的溶液懸浮或者洗滌直接從完整的培養細胞提取。史密斯等[1]把番茄的懸浮細胞用CaCl2濃度梯度洗滌齣伸展蛋白的前體流入小柱子。Scott和O’Neil[2]從鬍蘿蔔懸浮細胞中通過用不同濃度的含有CaCl2、TritonX100和0.1mol/LLiCl的溶液提取胞外蛋白。在0.1%TritonX100或0.1mol/LCaCl2中萃取後的懸浮細胞可以再重新迴到同樣的培養液中生長。
評分已經從挪威雲杉木質部懸浮培養的活細胞中提取瞭細胞壁的蛋白質。通過在1mol/L氯化鈉的緩衝液中孵育的方法將細胞壁蛋白質從經過過濾和洗滌的細胞中洗脫下來。分離的細胞進行勻漿,隨之蛋白質被釋放,但在離子作壁蛋白質中純化齣瞭與延伸相關的細胞壁蛋白質[17洗脫細胞壁的蛋白質。通過離子交換,氯化鈣與結閤蛋
評分提取細胞壁蛋白質最古老和溫和的方法可能包括在適當的溶液懸浮或者洗滌直接從完整的培養細胞提取。史密斯等[1]把番茄的懸浮細胞用CaCl2濃度梯度洗滌齣伸展蛋白的前體流入小柱子。Scott和O’Neil[2]從鬍蘿蔔懸浮細胞中通過用不同濃度的含有CaCl2、TritonX100和0.1mol/LLiCl的溶液提取胞外蛋白。在0.1%TritonX100或0.1mol/LCaCl2中萃取後的懸浮細胞可以再重新迴到同樣的培養液中生長。
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