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张丽萍，魏民，王桂云 编

图书标签:

• 生物化学
• 实验
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• 高校教材
• 理学
• 化学
• 生物
• 实验指导
• 大学生
• 专业课程

出版社： 高等教育出版社

ISBN：9787040332469

版次：1

商品编码：10867894

包装：平装

开本：16开

出版时间：2011-09-01

用纸：胶版纸

页数：149

正文语种：中文

内容简介

《生物化学实验指导》共分4篇。第1篇为基础性实验，除生物化学实验最核心的概念和技术外，适当穿插了现代生物化学实验的新方法、新技术。本篇实验按通用的体例编写。第2篇为综合性实验，第3篇为研究性实验，这两篇实验为开展研究性的实验教学，已经过多年的探索与实践。第4篇为中学相关生物学实验指导，内容主要包括：总结生物化学学科在《全日制义务教育生物课程标准》和《普通高中生物课程标准》中的相关实验内容，并就实验的设计、操作、改进等方面提出指导性的建议，对实验中常见的问题进行解析与指导。

目录

生物化学实验学习方法
生物化学实验室规则
第1篇 基础性实验
实验1 蛋白质浓度测定
1-1 凯氏定氮法测定蛋白质含量
1-2 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量
1-3 紫外吸收法测定蛋白质含量
1-4 考马斯亮蓝染色法（Bradford法）测定蛋白质含量
实验2 氨基酸的纸层析
实验3 血清清蛋白与γ球蛋白的盐析
实验4 血清清蛋白与γ球蛋白的透析与浓缩
实验5 血清清蛋白与γ球蛋白的鉴定——醋酸纤维素薄膜电泳法
实验6 凝胶过滤分离蛋白质
实验7 离子交换柱层析分离纯化抗体
实验8 聚丙烯酰胺凝胶圆盘状电泳法分离血清蛋白
实验9 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶
实验10 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离过氧化物酶同工酶
实验11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量
实验12 等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
实验13 影响酶作用的因素
13-1 温度对唾液淀粉酶活力的影响
13-2 pH对唾液淀粉酶活力的影响
13-3 唾液淀粉酶的激活与抑制
13-4 唾液淀粉酶的专一性
实验14 脲酶Km值的测定
实验15 脲酶比活力的测定
实验16 乳酸脱氢酶的活力测定
实验17 丙氨酸氨基转移酶活性的鉴定——纸层析法
实验18 血清中丙氨酸氨基转移酶活力单位的测定——比色法
实验19 酶联法检测血清丙氨酸氨基转移酶的活性
实验20 肝组织中DNA的提取
实验21 DNA含量的测定——二苯胺法
实验22 琼脂糖凝胶电泳法鉴定DNA
实验23 酵母RNA提取——稀碱法
实验24 RNA含量测定
24-1 定磷法测定RNA含量
24-2 苔黑酚法测定RNA含量
24-3 紫外吸收法测定RNA含量
实验25 正交法优化多糖的提取工艺
实验26 单寡糖与多糖的含量测定——苯酚一硫酸法
实验27 多糖的单糖组成分析——薄层层析分析法
实验28 气相色谱法分析多糖的组成
实验29 多糖相对分子质量分布分析——Sepharose CL-6B柱层析法
实验30 脂肪酸的B-氧化作用——酮体的生成及测定
实验31 大豆粗脂肪的提取和定量分析
实验32 维生素C含量的定量测定——2，6-二氯酚靛酚法
实验33 激素对血糖浓度的影响
实验34 兔抗人抗血清的制备
实验35 双向免疫扩散实验
实验36 间接酶联免疫吸附（EIJSA）测定抗体效价
实验37 Western blotting方法检测抗体特异性
第2篇 综合性实验
综合性实验1 不同大豆品种质量分析
综合性实验2 血清清蛋白与γ球蛋白的分离与鉴定
综合性实验3 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白及乳酸脱氢酶同工酶
综合性实验4 丙氨酸氨基转移酶的鉴定与活力单位的测定
综合性实验5 核酸的提取与定量
综合性实验6 脲酶的制备及酶学性质研究
综合性实验7 兔抗人抗血清的制备及鉴定
第3篇 研究性实验
研究性实验案例 中草药中糖类物质的分离与测定
第4篇 中学相关生物学实验指导（生物化学篇）
一、中学生物课程标准中的生物化学实验内容概述
二、中学生物化学实验指导与设计分析
三、中学生物学综合性、研究性实验立项及设计思路
参考文献
附录
Ⅰ 常用基本度量仪器的使用
Ⅱ 分光光度计的使用
Ⅲ 玻璃仪器的洗涤和干燥
Ⅳ 溶液的配制
Ⅴ 酸碱溶液的标定
Ⅵ 一般化学试剂的规格
Ⅶ 常用缓冲溶液的配制方法

《分子生物学技术与应用》图书简介 探寻生命的奥秘，驾驭前沿的分子工具 书籍概述 《分子生物学技术与应用》是一本全面、深入、紧密结合现代生物科技发展前沿的实验指导手册与理论参考著作。本书旨在为生命科学、生物技术、医学研究及相关交叉学科的师生、科研人员和技术工作者提供一套系统、详实且高度实用的分子生物学实验技术指导体系。本书不仅涵盖了分子生物学的经典核心技术，更重点介绍了近年来发展迅猛的基因编辑、高通量测序、单细胞分析等尖端技术的操作流程、原理剖析及数据解读方法，力求搭建理论与实践之间的坚实桥梁。 本书的编撰遵循“原理清晰、步骤详尽、案例丰富、应用导向”的原则，确保读者能够从零基础快速入门，并最终能够独立设计、执行和优化复杂的分子生物学实验项目。全书内容力求平衡理论深度与操作可操作性，强调实验的严谨性、可重复性及结果的可靠性。 核心内容与技术覆盖 本书的结构设计旨在覆盖分子生物学实验从样本制备到高级分析的完整链条，共分为以下几个主要部分： 第一部分：分子生物学基础与通用技术 核酸的提取、纯化与定量： 详细阐述了从不同来源（细菌、酵母、植物、动物组织和血液）高效提取DNA、RNA的方法，包括硅胶柱法、酚氯仿萃取法等。重点讨论了对提取效率、纯度（A260/A280、A260/A230比值）的精确控制与质量评估。同时，深入介绍了使用微量分光光度计和荧光定量方法进行核酸定量的原理与优化技巧。 凝胶电泳与Southern/Northern Blotting： 详述了琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离原理，包括影响分辨率的关键因素（电压、缓冲液、凝胶浓度）。对于经典的应用——Southern Blotting（DNA检测）和Northern Blotting（RNA检测），本书提供了高灵敏度探针设计、杂交、洗脱及信号检测的标准化SOP，并讨论了放射性同位素与非放射性标记方法的优劣。 聚合酶链式反应（PCR）及其变体： 作为分子生物学的基石技术，本书给予了详尽的篇幅。涵盖了标准PCR、热启动PCR、高保真PCR的原理。重点剖析了实时荧光定量PCR (qPCR) 的体系构建、标准曲线绘制、Ct值分析及其在基因表达量化中的应用。此外，还涵盖了反转录PCR (RT-PCR) 和逆转录定量PCR (RT-qPCR) 的全流程操作。 第二部分：基因克隆、表达与操作技术 重组DNA技术与载体构建： 深入讲解了限制性内切酶的选择、消化、连接反应的优化策略（如粘性末端与平末端连接的效率差异）。详细介绍了各类常用载体的结构特点（质粒、噬菌体、病毒载体），及其在原核（如大肠杆菌）和真核细胞表达系统中的应用选择。 基因的体外扩增与修饰： 重点阐述了定点突变技术的设计思路、引物设计准则以及使用QuikChange等方法的具体操作流程。涵盖了利用PCR技术进行DNA片段的定长、定点修饰，为后续的基因功能研究奠定基础。 高效的转化与筛选策略： 对大肠杆菌的化学转化和电击转化技术进行了细致的对比和操作要点总结。讨论了筛选阳性克隆的平板筛选、蓝白筛选法的原理及常见问题排查。 第三部分：蛋白质的检测与分析 SDS-PAGE与Western Blotting： 提供了蛋白质样品制备（裂解液选择、蛋白酶抑制剂的正确使用）的详尽指南。详细解析了SDS-PAGE的分离机制，并重点指导了Western Blotting中抗体的选择（一抗、二抗的孵育条件）、封闭优化和显影技术的优化，以提高信号的特异性和灵敏度。 蛋白质的酶联免疫吸附测定 (ELISA)： 阐述了间接法、直接法、竞争法和夹心法ELISA的原理、实验设计与质量控制（如标准品的线性范围、批间差异）。 蛋白质互作研究技术： 简要介绍了酵母双杂交 (Y2H) 的基本原理及其在筛选蛋白质相互作用伙伴中的应用。 第四部分：基因组学与后基因组学前沿技术 新一代测序技术 (NGS) 基础： 系统介绍了Illumina测序平台（如WES、WGS、RNA-Seq）的文库构建流程、测序原理及主要步骤。 生物信息学初步分析： 提供了NGS原始数据（FASTQ文件）的基础质控（如FastQC报告解读）、序列比对（Alignment）和变异检测（Variant Calling）的入门级流程介绍，强调数据分析的规范性。 基因编辑技术（CRISPR/Cas9）： 深入探讨了CRISPR系统的组成、sgRNA的设计原则（脱靶风险控制）、递送方法（脂质体、电穿孔）以及基因编辑效率的验证方法（如T7E1酶切分析、插入缺失测序）。 单细胞测序（scRNA-seq）准备： 简述了单细胞悬液的制备要求及其在微流控平台上的捕获流程，为数据解读打下实验基础。 本书的特色与价值 1. 操作流程的精细化： 每一项关键技术都配有“试剂准备”、“步骤分解”、“关键点提醒”和“常见问题与故障排除”模块，确保实验顺利进行。 2. 数据解读的强化： 不仅停留在技术操作层面，更强调实验结果的科学解读，如qPCR的标准曲线斜率、Western Blot条带的定量分析等。 3. 安全与规范： 强调实验室安全操作规程，尤其是在处理高风险试剂（如强酸强碱、病毒载体）和生物安全等级相关的实验中，提供了明确的安全指导。 4. 前沿技术的集成： 将分子生物学经典技术与当前生命科学研究热点（如基因组编辑、高通量测序）有机结合，使本书具有长期的参考价值。 适用读者对象 生命科学、生物工程、生物医学工程等相关专业本科生、研究生。 高校、科研院所、生物制药公司从事分子生物学实验的研发人员和技术人员。 希望系统复习和提升分子生物学实验技能的实验室新成员。 通过系统学习本书内容，读者将能够掌握分子生物学领域的核心技术，具备独立开展高水平科研实验的能力，从而在生命科学的研究与应用中取得突破。

评分☆☆☆☆☆

作为一名生物化学专业的学生，我深知实验在学习过程中的重要性。《生物化学实验指导》这本书，可以说是为我量身打造的。它精心挑选了一系列具有代表性的生物化学实验，从最基础的溶液配制到复杂的分子生物学技术，都涵盖得非常全面。书中的实验步骤讲解清晰明了，图文并茂，让我能够轻松掌握每一个操作细节。更重要的是，作者并没有仅仅停留在操作层面，而是花费了大量的篇幅来解释实验原理，并结合生动形象的比喻，将抽象的理论知识具象化，这极大地帮助我理解了实验的科学本质。每当我遇到实验中的疑难杂症时，都会翻阅书中的“注意事项”和“常见问题分析”部分，总能找到有效的解决方案。此外，书中提供的多种实验设计方案和数据分析方法，让我能够根据自己的实际情况进行灵活调整，并从中获得更深刻的实验体会。这本书对我而言，不仅是一本实验指导书，更是一本能够激发我学习热情、培养我独立思考能力的良师益友。

评分☆☆☆☆☆

这本书简直是打开了我新世界的大门！我一直觉得生物化学实验又枯燥又难，每次上实验课都像是在打仗。但是自从我有了这本《生物化学实验指导》，我感觉一切都变得不一样了。它不是那种死板的教科书，而是像一个经验丰富的老师，手把手地教我怎么做实验。书里的每个实验都写得特别详细，从准备工作到最后的步骤，一步一步地教你，而且还有很多漂亮的图片，让你清楚地知道每一步应该是什么样子。我最喜欢的是它在每个实验前面都讲了实验的原理，让我知道为什么要做这个实验，这个实验能告诉我们什么，这样我做起来就更有信心了，不再是稀里糊涂地跟着步骤走。还有，书里有很多小贴士，告诉我做实验的时候要注意什么，怎么才能做得更好，还能避免一些常见的错误。我以前写实验报告总是抓耳挠腮，不知道怎么写，但这本书里有很多关于结果分析和讨论的建议，让我写报告的时候有了头绪，而且报告的质量也提高了很多。这本书真的让我觉得生物化学实验不再是畏途，而是充满了乐趣和挑战的探索过程。

评分☆☆☆☆☆

我之前参加过一些生物化学相关的研究项目，但感觉自己的实验操作技能和理论理解都还比较薄弱。偶然的机会，我看到了这本《生物化学实验指导》，它给了我一个全新的视角来审视和学习生物化学实验。书中的实验项目设计非常有深度，不仅仅局限于基础操作，还包含了许多前沿的生物化学技术，例如基因工程、蛋白质组学等相关的实验模块。作者在阐述实验步骤时，并没有流于表面，而是深入挖掘了每个步骤背后的科学依据，并对可能遇到的问题进行了细致的分析和预警，这对于我这种希望深入理解实验原理的学生来说，非常有启发性。此外，书中对实验数据的处理和统计分析部分也给予了极大的重视，提供了多种实用的工具和方法，让我能够更有效地从海量数据中提取有价值的信息。我尤其喜欢书中关于实验设计优化和创新方向的探讨，这让我看到了将理论知识应用于解决实际科学问题的可能性。总的来说，这本书不仅是一本实用的实验指导，更是一本激发科研兴趣、培养科学思维的宝贵资源，对于我未来的学术和科研发展有着深远的意义。

评分☆☆☆☆☆

说实话，一开始我只是抱着试试看的心态购买了这本《生物化学实验指导》，毕竟市面上相关的教材也不少，很难说哪本能真正满足我的需求。但这本书给我带来的惊喜是巨大的。它最大的特点在于其理论与实践的完美结合。书中的实验项目选择非常具有代表性，都是生物化学领域中经典且基础的实验，例如DNA电泳、Western Blotting、ELISA等等。作者在讲解实验步骤时，不仅关注“怎么做”，更侧重于“为什么这么做”，深入浅出地解释了每一个操作背后的生化原理，以及可能出现的各种情况和应对方法。这对于我这种希望不仅仅是完成实验，更希望真正理解其科学本质的学生来说，至关重要。书中的数据分析部分也做得相当到位，提供了多种分析方法和图表绘制技巧，让我能够更准确、更科学地解读实验结果。我尤其欣赏的是，书中还针对一些进阶的实验技术，提供了扩展阅读和相关的文献索引，这无疑为我进一步深入学习打下了坚实的基础。总而言之，这不仅仅是一本操作手册，更是一本引导我们思考、探索的科学指南，极大地提升了我的实验技能和科学素养。

评分☆☆☆☆☆

这本书简直是我的救命稻草！我是一名大二的生物化学专业的学生，之前的基础实验课简直让我焦头烂额，实验操作不熟练，数据分析更是云里雾里。拿到这本《生物化学实验指导》后，感觉整个世界都亮了。首先，书中的实验设计非常贴合教学大纲，涵盖了我课程中所有重要的实验项目，比如酶活性测定、蛋白质提取纯化、核酸分析等等。最让我惊喜的是，每一章都配备了详细的实验步骤，文字描述清晰易懂，而且配上了大量精美的插图和流程图，即使是第一次接触某个实验，也能很快上手。我尤其喜欢它对实验原理的讲解，不再是那种干巴巴的理论堆砌，而是用通俗易懂的语言解释了每个实验背后的科学道理，这让我做实验的时候更有方向感，知道自己在做什么，为什么这么做。而且，它还提供了不同方案的实验设计和优化思路，这对于我们这种喜欢刨根问底的学生来说，简直是如获至宝。每次做完实验，我都会翻到后面的讨论部分，那里有很多关于结果分析、误差来源以及如何改进实验的建议，这对我理解实验结果、撰写实验报告非常有帮助。以前我做实验总是凭感觉，现在有了这本书，我感觉自己像个真正的研究者，能够更系统、更深入地去探索生物化学的奥秘。