生命科学实验指南系列：人干细胞培养 [Culture of Human Stem Cells] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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[英] R.I.弗雷谢尼，[英] G.N.斯泰赛，[美] J.M.奥尔贝奇 著，章静波，陈实平 等 译

图书标签:

• 干细胞
• 人干细胞
• 细胞培养
• 生命科学
• 实验指南
• 生物技术
• 再生医学
• 组织工程
• 医学研究
• 实验室技术

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030231680

版次：1

商品编码：11883030

包装：平装

丛书名： 生命科学实验指南系列

外文名称：Culture of Human Stem Cells

开本：16开

出版时间：2009-01-01

用纸：胶版纸

页数：293

字数：436000

正文语种：中文

内容简介

　　《生命科学实验指南系列：人干细胞培养》是R.IanFreshney主编的特殊细胞培养（Culture of Specialized Cells）系列丛书之一，旨在介绍近年来涌现出来的诸多干细胞培养方法中*有效和*灵敏的方法与技术。其中包括干细胞系的质量控制程序、胚胎干细胞系的获取与培养、胚胎干细胞和胚胎癌细胞的神经分化技术、ES细胞的心肌细胞分化、生殖细胞谱系的培养、胚胎癌干细胞的获取和培养、脐带和脐带血干细胞的培养、牙髓中的多能干细胞、骨髓基质来源的间充质干／祖细胞的培养原则和鉴定、疏松结缔组织干／祖细胞的分离、鉴定和培养、角膜干细胞的培养、乳腺干细胞的培养以及脂肪干细胞的培养。《生命科学实验指南系列：人干细胞培养》每章有简明的导言，介绍背景知识及进展，然后详尽描述培养方法，其中包括培养基和试剂的准备，有的章节还推荐不同的方案供试用者选择，因此《生命科学实验指南系列：人干细胞培养》具有一定的实用性与时效性。
　　《生命科学实验指南系列：人干细胞培养》可供干细胞知识与应用相关领域的科研人员、临床医生、高等院校师生、生物工程人员参考。

内页插图

目录

译者的话
前言

第1章 干细胞系的质量控制程序
1．1 导言
1．2 细胞入库原则
1．3 细胞特性
1．4 无菌
1．5 支原体检测
1．6 其他微生物污染和潜在的生物危害
1．7 培养条件、试剂及培养基的质量控制
1．8 结论
参考文献
附录1使用Ⅱ类生物安全橱时的某些注意事项

第2章 人胚胎干细胞系：衍生与培养
2．1 引言
2．2 细胞培养基成分
2．3 小鼠胚胎饲养细胞（MEF）的制备
2．4 人胚胎干细胞的诱导
2．5 人胚胎干细胞的增殖
2．6 hES细胞的冻存
2．7 hES细胞的特性鉴定
2．8 利用hES细胞进行分化研究
2．9 材料来源
参考文献

第3章 人EC和ES细胞神经分化技术
3．1 引言
3．2 其他方法
3．3 方法的原理和优势
3．4 培养基和试剂的准备
3．5 细胞培养
3．6 冻存
3．7 分化
3．8 分析
3．9 高通量筛选
3．1 0材料来源
参考文献

第4章 人胚胎干细胞向心肌细胞的分化
4．1 引言
4．2 方法概述
4．3 培养基与试剂的准备
4．4 hESC分化为心肌细胞的操作方案
4．5 材料来源
参考文献

第5章 人生殖细胞谱系的培养
5．1 引言
5．2 培养基及试剂配制细则
5．3 细胞培养方法学
5．4 培养物鉴定与特性分析
5．5 人生殖细胞培养物的分化
5．6 冻存
5．7 材料来源
参考文献

第6章 人胚胎癌（EC）干细胞系的来源和培养
6．1 背景知识
6．2 试剂的准备
6．3 方案
6．4 特征
6．5 低温保存
6．6 材料来源
参考文献

第7章 脐带和脐血来源干细胞的培养
7．1 背景介绍
7．2 培养基和试剂的制备
7．3 具体方案
7．4 脐带来源细胞的生物学特征
7．5 材料来源
参考文献

第8章 牙髓多能干细胞
8．1 背景介绍
8．2 培养基与试剂的制备
8．3 培养的具体方案
8．4 分化潜能与鉴定
8．5 讨论
8．6 材料来源
参考文献

第9章 骨髓基质来源的间充质干／祖细胞（MSCs）的培养基本原则和鉴定
9．1 引言
9．2 培养基和试剂的准备
9．3 分离人骨髓细胞用于MSCs扩增
9．4 处理人骨髓细胞用于MSCs培养
9．5 MSCs培养物的扩增和冻存
9．6 鉴定
9．7 附加方案：大鼠MSCs的获得和扩增
9．8 MSCs扩增技术注释
9．9 概要和评述
9．1 0材料来源
参考文献

第10章 软结缔组织干／祖细胞的分离、鉴定和培养
10．1 研究背景
10．2 培养基和试剂准备
10．3 从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞
10．4 从人胎儿软骨中分离软骨祖细胞
10．5 从人滑膜中分离祖细胞
10．6 材料来源
参考文献

第11章 人角膜干细胞的培养
11．1 概述
11．2 培养基和试剂的配制
11．3 人角膜缘干细胞（LSC）的培养
11．4 培养人角膜间质干细胞
11．5 人角膜内皮干细胞的培养
11．6 小结
11．7 材料和供应商清单
参考文献

第12章 乳腺干细胞的培养
12．1 培养干细胞的必要性
12．2 乳腺干细胞存在的证据
12．3 乳腺细胞培养基的组成
12．4 乳腺干细胞培养模式
12．5 结果矛盾还是数据不同
12．6 结论
12．7 材料来源
参考文献

第13章 脂肪来源干细胞的组织培养
13．1 背景知识
13．2 培养基和试剂的准备
13．3 取材和细胞分离
13．4 脂肪干细胞培养和扩增
13．5 ASCs的特征及分化
13．6 材料来源
参考文献
缩略语
索引

前言/序言

　　在过去的几年中，由于对人干细胞的研究兴趣激增，开辟了一个探索从最早期的细胞到功能充分分化的细胞（诸如神经元、心肌细胞以及如骨和软骨这种坚硬组织的细胞）的分化调控领域。这不仅为研究调控机制提供了模型，而且也为组织修复所需的工程生产合适的移植物创造了有意义的机会。胚胎干细胞、从脐带和牙胚（toothgerm）获得的干细胞、从骨髓和其他部位获得的成体干细胞均为异体移植物或自体移植物提供了潜在的源泉。有关干细胞的特性、干细胞识别标志的探讨，以及伴随正常干细胞和胚胎癌分化表型表达的标志表达调控改变已有不少论述。本书的目的在于直接介绍干细胞培养的方法学和其特性。虽然其中的不少技术仍处于发展阶段，但现仍有众多的已建立的技术需要介绍给涌人干细胞研究领域的研究者们。
　　本书遵循以前Cultureo厂SpecializedCells系列丛书的传统方式撰写，在来自胚胎的、新生的、成体的组织中的众多干细胞中，只描述有限的代表性技术，其重点在于实践指导。研究者只要有一定的基础，在没有原始文献来源或其他出版物的情况下，仍应有可能按本书方案进行实验。因此本书提供的是一种适合的入门性指导，它使得进入该领域的新手们，其中包括基础科学的和有临床背景的研究人员，熟悉当前被人们所应用的某些技术方法，以及增进他们在该领域的知识，或者有助于发展他们自己的研究项目。

细胞生物学前沿技术：高级哺乳动物细胞共培养系统构建与应用 本书聚焦于现代细胞生物学和组织工程领域中最具挑战性与前沿性的研究方向之一：复杂三维（3D）多细胞共培养系统的构建、优化与应用。 随着对生命过程理解的不断深入，单一细胞系或二维（2D）培养体系已无法完全模拟体内复杂的微环境。本书旨在为高阶研究人员、博士研究生以及生物技术专家提供一套全面、深入且高度实用的技术蓝图，用以设计和实施能够重现生理组织结构与功能的先进共培养模型。 核心主题：超越传统，迈向类器官与类器官芯片（Organ-on-a-Chip） 本书将深入探讨如何利用先进的生物材料科学、微流控技术与细胞生物学原理，成功构建和维护具备高度生物学相关性的多细胞系统。内容严格围绕共培养体系的设计、实现和数据解读展开，完全不涉及人干细胞的特定培养方法、克隆化技术或特定干细胞谱系分化路径的详细操作规程。 第一部分：复杂共培养系统的理论基础与设计哲学（约350字） 本部分阐述从2D到3D培养模式转变的必要性，强调细胞间通讯和基质微环境在决定细胞命运与功能中的关键作用。 细胞微环境的动态重塑： 深入分析细胞外基质（ECM）组分（如胶原蛋白、纤连蛋白、层粘连蛋白）在指导细胞形态、极性和功能分化中的信号传导机制。讨论如何通过调整ECM的物理特性（硬度、孔隙率、纤维取向）来精确模拟不同器官的机械负荷。 多细胞异质性的重要性： 阐述在肿瘤微环境、免疫屏障或组织修复过程中，不同细胞群体（如基质细胞、内皮细胞、免疫细胞、间充质细胞等）之间信号对话（旁分泌、接触依赖性）如何驱动整体系统的功能表现。 模型选择的决策树： 提供一套系统的评估框架，帮助研究者根据实验目的（药物筛选、疾病建模、再生医学应用）选择合适的共培养策略，包括球形聚集体（Spheroids）、支架介导的3D结构，以及微流控驱动的类器官结构。 第二部分：先进共培养模型的构建与优化（约600字） 本章内容集中于构建不同复杂度的多细胞结构，重点介绍如何实现不同细胞类型的空间排布和功能集成。 水凝胶基质的高级应用： 详细介绍合成水凝胶（如PEG、PURA）和天然水凝胶（如I型胶原、甲基纤维素、藻酸盐）的选择标准。重点讲解通过光聚合、酶交联等技术实现水凝胶的时空可控硬化，以适应不同细胞群对机械刺激的差异化需求。 球形聚集体（Spheroids）的精细控制： 探讨基于U底板、磁性微球或悬浮培养技术制备均匀球体的优化方案。特别关注如何通过控制细胞接种密度和搅拌速率，实现球体内部的营养梯度和缺氧核心的模拟，这是高阶组织模型的重要特征。 类器官构建的工程学挑战（非干细胞特定）： 讨论在不依赖特定干细胞起始的情况下，如何通过精确的营养液配比和细胞比例组合，诱导异质性细胞群自组装形成具备基本组织结构（如极化上皮层、管腔结构）的类组织体。涉及对关键生长因子和抑制剂的剂量响应分析。 共培养中的界面工程： 详细解析如何构建模拟血管化或淋巴引流的界面。包括内皮细胞管形成的原位血管生成技术，以及如何利用特定的基质层分隔或融合不同功能区的细胞群。 第三部分：集成微流控系统：类器官芯片（Organ-on-a-Chip）的实现（约400字） 本部分深入探讨将3D共培养系统集成到微流控芯片平台上的工程技术，以实现对生理流体动力学和动态环境的模拟。 芯片材料与微加工技术： 比较PDMS、玻璃和生物相容性聚合物在微流控应用中的优劣。详细介绍光刻、软光刻（Soft Lithography）和3D打印技术在制造具有精确通道几何形状和孔隙度的芯片结构中的应用。 流体力学与剪切应力的控制： 阐述如何通过精确泵送系统（如蠕动泵、注射泵）提供模拟生理血流速度和湍流的剪切应力。讨论如何量化和调控作用于内皮细胞或机械敏感细胞（如成纤维细胞）上的流体力学信号。 多腔室与多模块集成： 介绍“器官连接体”（Body-on-a-Chip）的概念，即如何通过微通道将不同功能的共培养模块（例如，肝脏模块与肾脏模块）连接起来，模拟药物的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）过程。 第四部分：高级成像、分析与数据解读（约150字） 本部分侧重于对复杂3D共培养系统产生的大量功能性数据的获取与解释，强调非破坏性分析技术。 活细胞成像与时间序列分析： 介绍共聚焦显微镜（Confocal Microscopy）和双光子显微镜在获取深度、高分辨率3D图像时的配置与优化。强调使用荧光探针追踪细胞迁移、药物渗透和分子事件的时空动态。 高通量功能性指标的评估： 讨论如何量化共培养系统的成熟度，包括代谢活性测定（如LDH释放、ATP生成）、屏障功能测试（跨细胞电阻TEER测量）以及特定组织标志物的蛋白质组学或基因表达谱分析。 本书适合对象： 本书假定读者已具备扎实的细胞生物学、生物化学基础知识，并熟悉基本的细胞培养技术。它是为追求在组织工程、药物开发、基础生理学研究中引入高保真、高通量、动态化实验模型的科研工作者量身定制的高阶参考资料。通过本书的学习，研究人员将能够独立设计并实施复杂的三维多细胞共培养实验，从而推动生物医学研究迈向新的台阶。

评分☆☆☆☆☆

拿到这本书的时候，我的第一反应是它的信息密度太高了，需要反复研读才能消化。我主要关注的是诱导多能干细胞（iPSC）的重编程技术，尤其是非整合型方法。市面上多数资料对CRISPR/Cas9或慢病毒载体的应用描述得相对表面，但这本书却花了大量篇幅去解析载体构建的兼容性、转染效率的优化曲线，甚至详细对比了使用哪些特定的转录因子组合在不同宿主细胞（比如皮肤成纤维细胞和外周血单核细胞）上的最佳比例。最让我眼前一亮的是，它专门开辟了一章来讨论批间差异和质控标准。在将实验室研究成果向临床转化（Translation）的过程中，稳定性和可重复性是最大的拦路虎。这本书直面了这个问题，提供了详尽的SOP（标准操作流程）范本，包括如何设计阳性和阴性对照，如何进行间期分析以确保干性标志物的表达水平符合既定阈值。对于我这种需要撰写GLP报告的科研人员来说，这种事无巨细的规范性指导，极大地减轻了文档工作负担，让我的实验设计和数据阐释都更具说服力。它不仅仅是实验手册，更像是一套完整的质量管理体系的缩影。

评分☆☆☆☆☆

从排版和易读性的角度来看，这本书也给我留下了深刻的印象。很多专业书籍为了塞进更多信息，往往将页面排布得密密麻麻，阅读体验极差，让人望而生畏。而这本《生命科学实验指南系列》在这一点上做得很出色。它采用了大量的留白，图表和文字之间的逻辑关系非常清晰，关键术语和操作参数使用了粗体或斜体进行了醒目的标记，使得我在高强度阅读和快速查阅时，能够迅速定位到所需信息，而不会感到视觉疲劳。更贴心的是，它在每章末尾设置了“关键检查点”总结，这对于需要快速回顾或培训新进人员来说，是极其高效的工具。很多指南只关注“怎么做”，而这本书还探讨了“为什么这样做”的合理性，这体现在对不同细胞株的代谢需求差异的解释上，比如，iPSC对葡萄糖的需求通常高于某些终末分化细胞。这种兼顾操作实用性与理论深度的平衡感，让它成为我实验室工具书架上，使用频率最高的一本书，几乎是我进行任何干细胞相关实验前，都会翻阅一遍的“定心丸”。

评分☆☆☆☆☆

这本《生命科学实验指南系列：人干细胞培养》真是让我找到了久违的“踏实感”。我最近在进行一个关于早期胚胎发育的研究课题，涉及到一些非常精密的干细胞操作，市面上的很多指南要么过于理论化，要么就是操作步骤写得语焉不详，让人光看就头大。但这本书不一样，它简直就像是我手边那位经验丰富、脾气又好的实验室导师，手把手地教你。比如，在处理胚胎干细胞（ESC）的首次复苏时，那些关于缓冲液渗透压微调、血清批次差异的考量，作者都深入地探讨了，并且给出了不同来源细胞系的“偏好设置”。我尤其欣赏它在细节处理上的严谨性，比如在说明胰酶消化过程中，光是不同温度下的时间控制就有好几个对照组的建议，这对于需要高效率存活率的实验来说，简直是救命稻草。那些关于无菌操作的“禁忌”也被列得清清楚楚，很多是教科书上不提，但在实际操作中却至关重要的“行话”和经验总结，读起来让人感觉自己正在接受最顶尖的专业训练。它不是简单地罗列步骤，而是剖析了每一步背后的生物学原理，让我从“按部就班”的执行者，变成了真正理解细胞需求的“调控者”。这本书的图示清晰度也值得称赞，那些细胞集落形态的对比照片，色彩还原度极高，能清晰分辨出健康、分化边缘和污染的微小差别。

评分☆☆☆☆☆

说实话，我最初抱着怀疑的态度翻开了这本书，因为我主要关注的是特定的神经元分化通路，一个非常小众且前沿的领域。我担心这本“综合指南”会不会像很多大而全的书籍一样，在深度上有所欠缺。然而，我惊喜地发现，它在基础培养的坚实基础上，对各种下游分化路径的介绍，其深度远超我的预期。例如，在描述如何诱导神经前体细胞（NPCs）时，它不仅仅停留在添加生长因子层面，而是深入解析了Wnt/$eta$-catenin信号通路在早期胚层选择中的剂量效应。作者似乎对最新的文献追踪得非常紧密，书中引用了许多近两三年内发表在顶级期刊上的创新方法，并且对这些方法的优缺点进行了冷静且客观的评价，没有那种盲目推崇新技术的倾向。这种平衡的视角，对于我们这些需要不断权衡成本、效率和实验结果可重复性的研究者来说，至关重要。它帮助我识别出哪些“热门”技术在实际操作中可能存在“陷阱”，从而避免了宝贵时间资源的浪费。这本书的结构设计也体现了编者的匠心，知识点层层递进，即便初学者也能循序渐进，而资深人士也能从中挖掘出优化细节。

评分☆☆☆☆☆

我必须强调这本书在“故障排除”（Troubleshooting）部分提供的帮助。在我的职业生涯中，失败的实验次数远多于成功的。干细胞培养的挑战性在于，很多问题都是潜伏性的，等到你发现时，可能整个培养皿已经无可挽回了。这本书对“培养环境失衡”的诊断尤其细致入微。它不只是列出“细胞出现斑点”的可能原因，而是将其分解到pH值漂移、氧气浓度波动、营养耗尽这三个维度，并指导读者如何通过特定的试剂监测方法来定位问题根源。比如，它会告诉你，如果传代后贴壁慢但形态尚可，首先要检查的不是培养基，而是胰酶接触时间是否略微过长导致细胞膜蛋白受损。这种对生物系统复杂性的深刻理解，使得这本书超越了简单的操作手册，更像是一部高阶的“生物工程诊断手册”。它教会我如何用科学的方法去“审问”我的细胞，而不是仅仅停留在“祈祷”它们保持健康状态的层面。这种转变，对提升我的实验信心和长期项目稳定性起到了决定性的作用。

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还不错?

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正版 印刷质量很好

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可以

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内容编写的很一般，图片印刷不清晰，有一些图片需要彩色才能看出效果，黑白的，印刷还不清楚，完全看不出来是什么

评分☆☆☆☆☆

很好

评分☆☆☆☆☆

内容编写的很一般，图片印刷不清晰，有一些图片需要彩色才能看出效果，黑白的，印刷还不清楚，完全看不出来是什么

评分☆☆☆☆☆

给个差评是因为希望更多人看见，书的质量真的很好

评分☆☆☆☆☆

很好，学习了，很强大的工具书，很好

评分☆☆☆☆☆

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