生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養 [Culture of Human Stem Cells] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[英] R.I.弗雷謝尼，[英] G.N.斯泰賽，[美] J.M.奧爾貝奇 著，章靜波，陳實平 等 譯

圖書標籤:

• 乾細胞
• 人乾細胞
• 細胞培養
• 生命科學
• 實驗指南
• 生物技術
• 再生醫學
• 組織工程
• 醫學研究
• 實驗室技術

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030231680

版次：1

商品編碼：11883030

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

外文名稱：Culture of Human Stem Cells

開本：16開

齣版時間：2009-01-01

用紙：膠版紙

頁數：293

字數：436000

正文語種：中文

內容簡介

　　《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》是R.IanFreshney主編的特殊細胞培養（Culture of Specialized Cells）係列叢書之一，旨在介紹近年來湧現齣來的諸多乾細胞培養方法中*有效和*靈敏的方法與技術。其中包括乾細胞係的質量控製程序、胚胎乾細胞係的獲取與培養、胚胎乾細胞和胚胎癌細胞的神經分化技術、ES細胞的心肌細胞分化、生殖細胞譜係的培養、胚胎癌乾細胞的獲取和培養、臍帶和臍帶血乾細胞的培養、牙髓中的多能乾細胞、骨髓基質來源的間充質乾／祖細胞的培養原則和鑒定、疏鬆結締組織乾／祖細胞的分離、鑒定和培養、角膜乾細胞的培養、乳腺乾細胞的培養以及脂肪乾細胞的培養。《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》每章有簡明的導言，介紹背景知識及進展，然後詳盡描述培養方法，其中包括培養基和試劑的準備，有的章節還推薦不同的方案供試用者選擇，因此《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》具有一定的實用性與時效性。
　　《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》可供乾細胞知識與應用相關領域的科研人員、臨床醫生、高等院校師生、生物工程人員參考。

內頁插圖

目錄

譯者的話
前言

第1章 乾細胞係的質量控製程序
1．1 導言
1．2 細胞入庫原則
1．3 細胞特性
1．4 無菌
1．5 支原體檢測
1．6 其他微生物汙染和潛在的生物危害
1．7 培養條件、試劑及培養基的質量控製
1．8 結論
參考文獻
附錄1使用Ⅱ類生物安全櫥時的某些注意事項

第2章 人胚胎乾細胞係：衍生與培養
2．1 引言
2．2 細胞培養基成分
2．3 小鼠胚胎飼養細胞（MEF）的製備
2．4 人胚胎乾細胞的誘導
2．5 人胚胎乾細胞的增殖
2．6 hES細胞的凍存
2．7 hES細胞的特性鑒定
2．8 利用hES細胞進行分化研究
2．9 材料來源
參考文獻

第3章 人EC和ES細胞神經分化技術
3．1 引言
3．2 其他方法
3．3 方法的原理和優勢
3．4 培養基和試劑的準備
3．5 細胞培養
3．6 凍存
3．7 分化
3．8 分析
3．9 高通量篩選
3．1 0材料來源
參考文獻

第4章 人胚胎乾細胞嚮心肌細胞的分化
4．1 引言
4．2 方法概述
4．3 培養基與試劑的準備
4．4 hESC分化為心肌細胞的操作方案
4．5 材料來源
參考文獻

第5章 人生殖細胞譜係的培養
5．1 引言
5．2 培養基及試劑配製細則
5．3 細胞培養方法學
5．4 培養物鑒定與特性分析
5．5 人生殖細胞培養物的分化
5．6 凍存
5．7 材料來源
參考文獻

第6章 人胚胎癌（EC）乾細胞係的來源和培養
6．1 背景知識
6．2 試劑的準備
6．3 方案
6．4 特徵
6．5 低溫保存
6．6 材料來源
參考文獻

第7章 臍帶和臍血來源乾細胞的培養
7．1 背景介紹
7．2 培養基和試劑的製備
7．3 具體方案
7．4 臍帶來源細胞的生物學特徵
7．5 材料來源
參考文獻

第8章 牙髓多能乾細胞
8．1 背景介紹
8．2 培養基與試劑的製備
8．3 培養的具體方案
8．4 分化潛能與鑒定
8．5 討論
8．6 材料來源
參考文獻

第9章 骨髓基質來源的間充質乾／祖細胞（MSCs）的培養基本原則和鑒定
9．1 引言
9．2 培養基和試劑的準備
9．3 分離人骨髓細胞用於MSCs擴增
9．4 處理人骨髓細胞用於MSCs培養
9．5 MSCs培養物的擴增和凍存
9．6 鑒定
9．7 附加方案：大鼠MSCs的獲得和擴增
9．8 MSCs擴增技術注釋
9．9 概要和評述
9．1 0材料來源
參考文獻

第10章 軟結締組織乾／祖細胞的分離、鑒定和培養
10．1 研究背景
10．2 培養基和試劑準備
10．3 從正常人和骨關節炎患者的關節軟骨中分離軟骨祖細胞
10．4 從人胎兒軟骨中分離軟骨祖細胞
10．5 從人滑膜中分離祖細胞
10．6 材料來源
參考文獻

第11章 人角膜乾細胞的培養
11．1 概述
11．2 培養基和試劑的配製
11．3 人角膜緣乾細胞（LSC）的培養
11．4 培養人角膜間質乾細胞
11．5 人角膜內皮乾細胞的培養
11．6 小結
11．7 材料和供應商清單
參考文獻

第12章 乳腺乾細胞的培養
12．1 培養乾細胞的必要性
12．2 乳腺乾細胞存在的證據
12．3 乳腺細胞培養基的組成
12．4 乳腺乾細胞培養模式
12．5 結果矛盾還是數據不同
12．6 結論
12．7 材料來源
參考文獻

第13章 脂肪來源乾細胞的組織培養
13．1 背景知識
13．2 培養基和試劑的準備
13．3 取材和細胞分離
13．4 脂肪乾細胞培養和擴增
13．5 ASCs的特徵及分化
13．6 材料來源
參考文獻
縮略語
索引

前言/序言

　　在過去的幾年中，由於對人乾細胞的研究興趣激增，開闢瞭一個探索從最早期的細胞到功能充分分化的細胞（諸如神經元、心肌細胞以及如骨和軟骨這種堅硬組織的細胞）的分化調控領域。這不僅為研究調控機製提供瞭模型，而且也為組織修復所需的工程生産閤適的移植物創造瞭有意義的機會。胚胎乾細胞、從臍帶和牙胚（toothgerm）獲得的乾細胞、從骨髓和其他部位獲得的成體乾細胞均為異體移植物或自體移植物提供瞭潛在的源泉。有關乾細胞的特性、乾細胞識彆標誌的探討，以及伴隨正常乾細胞和胚胎癌分化錶型錶達的標誌錶達調控改變已有不少論述。本書的目的在於直接介紹乾細胞培養的方法學和其特性。雖然其中的不少技術仍處於發展階段，但現仍有眾多的已建立的技術需要介紹給湧人乾細胞研究領域的研究者們。
　　本書遵循以前Cultureo廠SpecializedCells係列叢書的傳統方式撰寫，在來自胚胎的、新生的、成體的組織中的眾多乾細胞中，隻描述有限的代錶性技術，其重點在於實踐指導。研究者隻要有一定的基礎，在沒有原始文獻來源或其他齣版物的情況下，仍應有可能按本書方案進行實驗。因此本書提供的是一種適閤的入門性指導，它使得進入該領域的新手們，其中包括基礎科學的和有臨床背景的研究人員，熟悉當前被人們所應用的某些技術方法，以及增進他們在該領域的知識，或者有助於發展他們自己的研究項目。

細胞生物學前沿技術：高級哺乳動物細胞共培養係統構建與應用 本書聚焦於現代細胞生物學和組織工程領域中最具挑戰性與前沿性的研究方嚮之一：復雜三維（3D）多細胞共培養係統的構建、優化與應用。 隨著對生命過程理解的不斷深入，單一細胞係或二維（2D）培養體係已無法完全模擬體內復雜的微環境。本書旨在為高階研究人員、博士研究生以及生物技術專傢提供一套全麵、深入且高度實用的技術藍圖，用以設計和實施能夠重現生理組織結構與功能的先進共培養模型。 核心主題：超越傳統，邁嚮類器官與類器官芯片（Organ-on-a-Chip） 本書將深入探討如何利用先進的生物材料科學、微流控技術與細胞生物學原理，成功構建和維護具備高度生物學相關性的多細胞係統。內容嚴格圍繞共培養體係的設計、實現和數據解讀展開，完全不涉及人乾細胞的特定培養方法、剋隆化技術或特定乾細胞譜係分化路徑的詳細操作規程。 第一部分：復雜共培養係統的理論基礎與設計哲學（約350字） 本部分闡述從2D到3D培養模式轉變的必要性，強調細胞間通訊和基質微環境在決定細胞命運與功能中的關鍵作用。 細胞微環境的動態重塑： 深入分析細胞外基質（ECM）組分（如膠原蛋白、縴連蛋白、層粘連蛋白）在指導細胞形態、極性和功能分化中的信號傳導機製。討論如何通過調整ECM的物理特性（硬度、孔隙率、縴維取嚮）來精確模擬不同器官的機械負荷。 多細胞異質性的重要性： 闡述在腫瘤微環境、免疫屏障或組織修復過程中，不同細胞群體（如基質細胞、內皮細胞、免疫細胞、間充質細胞等）之間信號對話（旁分泌、接觸依賴性）如何驅動整體係統的功能錶現。 模型選擇的決策樹： 提供一套係統的評估框架，幫助研究者根據實驗目的（藥物篩選、疾病建模、再生醫學應用）選擇閤適的共培養策略，包括球形聚集體（Spheroids）、支架介導的3D結構，以及微流控驅動的類器官結構。 第二部分：先進共培養模型的構建與優化（約600字） 本章內容集中於構建不同復雜度的多細胞結構，重點介紹如何實現不同細胞類型的空間排布和功能集成。 水凝膠基質的高級應用： 詳細介紹閤成水凝膠（如PEG、PURA）和天然水凝膠（如I型膠原、甲基縴維素、藻酸鹽）的選擇標準。重點講解通過光聚閤、酶交聯等技術實現水凝膠的時空可控硬化，以適應不同細胞群對機械刺激的差異化需求。 球形聚集體（Spheroids）的精細控製： 探討基於U底闆、磁性微球或懸浮培養技術製備均勻球體的優化方案。特彆關注如何通過控製細胞接種密度和攪拌速率，實現球體內部的營養梯度和缺氧核心的模擬，這是高階組織模型的重要特徵。 類器官構建的工程學挑戰（非乾細胞特定）： 討論在不依賴特定乾細胞起始的情況下，如何通過精確的營養液配比和細胞比例組閤，誘導異質性細胞群自組裝形成具備基本組織結構（如極化上皮層、管腔結構）的類組織體。涉及對關鍵生長因子和抑製劑的劑量響應分析。 共培養中的界麵工程： 詳細解析如何構建模擬血管化或淋巴引流的界麵。包括內皮細胞管形成的原位血管生成技術，以及如何利用特定的基質層分隔或融閤不同功能區的細胞群。 第三部分：集成微流控係統：類器官芯片（Organ-on-a-Chip）的實現（約400字） 本部分深入探討將3D共培養係統集成到微流控芯片平颱上的工程技術，以實現對生理流體動力學和動態環境的模擬。 芯片材料與微加工技術： 比較PDMS、玻璃和生物相容性聚閤物在微流控應用中的優劣。詳細介紹光刻、軟光刻（Soft Lithography）和3D打印技術在製造具有精確通道幾何形狀和孔隙度的芯片結構中的應用。 流體力學與剪切應力的控製： 闡述如何通過精確泵送係統（如蠕動泵、注射泵）提供模擬生理血流速度和湍流的剪切應力。討論如何量化和調控作用於內皮細胞或機械敏感細胞（如成縴維細胞）上的流體力學信號。 多腔室與多模塊集成： 介紹“器官連接體”（Body-on-a-Chip）的概念，即如何通過微通道將不同功能的共培養模塊（例如，肝髒模塊與腎髒模塊）連接起來，模擬藥物的吸收、分布、代謝和排泄（ADME）過程。 第四部分：高級成像、分析與數據解讀（約150字） 本部分側重於對復雜3D共培養係統産生的大量功能性數據的獲取與解釋，強調非破壞性分析技術。 活細胞成像與時間序列分析： 介紹共聚焦顯微鏡（Confocal Microscopy）和雙光子顯微鏡在獲取深度、高分辨率3D圖像時的配置與優化。強調使用熒光探針追蹤細胞遷移、藥物滲透和分子事件的時空動態。 高通量功能性指標的評估： 討論如何量化共培養係統的成熟度，包括代謝活性測定（如LDH釋放、ATP生成）、屏障功能測試（跨細胞電阻TEER測量）以及特定組織標誌物的蛋白質組學或基因錶達譜分析。 本書適閤對象： 本書假定讀者已具備紮實的細胞生物學、生物化學基礎知識，並熟悉基本的細胞培養技術。它是為追求在組織工程、藥物開發、基礎生理學研究中引入高保真、高通量、動態化實驗模型的科研工作者量身定製的高階參考資料。通過本書的學習，研究人員將能夠獨立設計並實施復雜的三維多細胞共培養實驗，從而推動生物醫學研究邁嚮新的颱階。

評分☆☆☆☆☆

從排版和易讀性的角度來看，這本書也給我留下瞭深刻的印象。很多專業書籍為瞭塞進更多信息，往往將頁麵排布得密密麻麻，閱讀體驗極差，讓人望而生畏。而這本《生命科學實驗指南係列》在這一點上做得很齣色。它采用瞭大量的留白，圖錶和文字之間的邏輯關係非常清晰，關鍵術語和操作參數使用瞭粗體或斜體進行瞭醒目的標記，使得我在高強度閱讀和快速查閱時，能夠迅速定位到所需信息，而不會感到視覺疲勞。更貼心的是，它在每章末尾設置瞭“關鍵檢查點”總結，這對於需要快速迴顧或培訓新進人員來說，是極其高效的工具。很多指南隻關注“怎麼做”，而這本書還探討瞭“為什麼這樣做”的閤理性，這體現在對不同細胞株的代謝需求差異的解釋上，比如，iPSC對葡萄糖的需求通常高於某些終末分化細胞。這種兼顧操作實用性與理論深度的平衡感，讓它成為我實驗室工具書架上，使用頻率最高的一本書，幾乎是我進行任何乾細胞相關實驗前，都會翻閱一遍的“定心丸”。

評分☆☆☆☆☆

這本《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》真是讓我找到瞭久違的“踏實感”。我最近在進行一個關於早期胚胎發育的研究課題，涉及到一些非常精密的乾細胞操作，市麵上的很多指南要麼過於理論化，要麼就是操作步驟寫得語焉不詳，讓人光看就頭大。但這本書不一樣，它簡直就像是我手邊那位經驗豐富、脾氣又好的實驗室導師，手把手地教你。比如，在處理胚胎乾細胞（ESC）的首次復蘇時，那些關於緩衝液滲透壓微調、血清批次差異的考量，作者都深入地探討瞭，並且給齣瞭不同來源細胞係的“偏好設置”。我尤其欣賞它在細節處理上的嚴謹性，比如在說明胰酶消化過程中，光是不同溫度下的時間控製就有好幾個對照組的建議，這對於需要高效率存活率的實驗來說，簡直是救命稻草。那些關於無菌操作的“禁忌”也被列得清清楚楚，很多是教科書上不提，但在實際操作中卻至關重要的“行話”和經驗總結，讀起來讓人感覺自己正在接受最頂尖的專業訓練。它不是簡單地羅列步驟，而是剖析瞭每一步背後的生物學原理，讓我從“按部就班”的執行者，變成瞭真正理解細胞需求的“調控者”。這本書的圖示清晰度也值得稱贊，那些細胞集落形態的對比照片，色彩還原度極高，能清晰分辨齣健康、分化邊緣和汙染的微小差彆。

評分☆☆☆☆☆

我必須強調這本書在“故障排除”（Troubleshooting）部分提供的幫助。在我的職業生涯中，失敗的實驗次數遠多於成功的。乾細胞培養的挑戰性在於，很多問題都是潛伏性的，等到你發現時，可能整個培養皿已經無可挽迴瞭。這本書對“培養環境失衡”的診斷尤其細緻入微。它不隻是列齣“細胞齣現斑點”的可能原因，而是將其分解到pH值漂移、氧氣濃度波動、營養耗盡這三個維度，並指導讀者如何通過特定的試劑監測方法來定位問題根源。比如，它會告訴你，如果傳代後貼壁慢但形態尚可，首先要檢查的不是培養基，而是胰酶接觸時間是否略微過長導緻細胞膜蛋白受損。這種對生物係統復雜性的深刻理解，使得這本書超越瞭簡單的操作手冊，更像是一部高階的“生物工程診斷手冊”。它教會我如何用科學的方法去“審問”我的細胞，而不是僅僅停留在“祈禱”它們保持健康狀態的層麵。這種轉變，對提升我的實驗信心和長期項目穩定性起到瞭決定性的作用。

評分☆☆☆☆☆

說實話，我最初抱著懷疑的態度翻開瞭這本書，因為我主要關注的是特定的神經元分化通路，一個非常小眾且前沿的領域。我擔心這本“綜閤指南”會不會像很多大而全的書籍一樣，在深度上有所欠缺。然而，我驚喜地發現，它在基礎培養的堅實基礎上，對各種下遊分化路徑的介紹，其深度遠超我的預期。例如，在描述如何誘導神經前體細胞（NPCs）時，它不僅僅停留在添加生長因子層麵，而是深入解析瞭Wnt/$eta$-catenin信號通路在早期胚層選擇中的劑量效應。作者似乎對最新的文獻追蹤得非常緊密，書中引用瞭許多近兩三年內發錶在頂級期刊上的創新方法，並且對這些方法的優缺點進行瞭冷靜且客觀的評價，沒有那種盲目推崇新技術的傾嚮。這種平衡的視角，對於我們這些需要不斷權衡成本、效率和實驗結果可重復性的研究者來說，至關重要。它幫助我識彆齣哪些“熱門”技術在實際操作中可能存在“陷阱”，從而避免瞭寶貴時間資源的浪費。這本書的結構設計也體現瞭編者的匠心，知識點層層遞進，即便初學者也能循序漸進，而資深人士也能從中挖掘齣優化細節。

評分☆☆☆☆☆

拿到這本書的時候，我的第一反應是它的信息密度太高瞭，需要反復研讀纔能消化。我主要關注的是誘導多能乾細胞（iPSC）的重編程技術，尤其是非整閤型方法。市麵上多數資料對CRISPR/Cas9或慢病毒載體的應用描述得相對錶麵，但這本書卻花瞭大量篇幅去解析載體構建的兼容性、轉染效率的優化麯綫，甚至詳細對比瞭使用哪些特定的轉錄因子組閤在不同宿主細胞（比如皮膚成縴維細胞和外周血單核細胞）上的最佳比例。最讓我眼前一亮的是，它專門開闢瞭一章來討論批間差異和質控標準。在將實驗室研究成果嚮臨床轉化（Translation）的過程中，穩定性和可重復性是最大的攔路虎。這本書直麵瞭這個問題，提供瞭詳盡的SOP（標準操作流程）範本，包括如何設計陽性和陰性對照，如何進行間期分析以確保乾性標誌物的錶達水平符閤既定閾值。對於我這種需要撰寫GLP報告的科研人員來說，這種事無巨細的規範性指導，極大地減輕瞭文檔工作負擔，讓我的實驗設計和數據闡釋都更具說服力。它不僅僅是實驗手冊，更像是一套完整的質量管理體係的縮影。

評分☆☆☆☆☆

很好，學習瞭，很強大的工具書，很好

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愛學習，愛生活，愛讀書！

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很好，學習瞭，很強大的工具書，很好

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很好，不錯，就是太貴

評分☆☆☆☆☆

可以

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買瞭以後發現這個不能吃

評分☆☆☆☆☆

很好

評分☆☆☆☆☆

很好，學習瞭，很強大的工具書，很好

評分☆☆☆☆☆

買瞭以後發現這個不能吃