[按需印刷] 魚類細胞培養理論與技術(精)

[按需印刷] 魚類細胞培養理論與技術(精) pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

陳鬆林,秦啓偉 著
圖書標籤:
  • 魚類細胞培養
  • 細胞生物學
  • 生物技術
  • 水産養殖
  • 實驗技術
  • 實驗室操作
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店鋪: 科學齣版社旗艦店
齣版社: 科學齣版社
ISBN:9787030302847
商品編碼:1262471982
包裝:平裝
齣版時間:2014-08-01
頁數:300
字數:442000
正文語種:中文

具體描述


圖書基本信息


書名:魚類細胞培養理論與技術
ISBN:9787030302847
著者:陳鬆林,秦啓偉
齣版社:科學齣版社
POD版定價:168元
正文語言:中文
裝幀:平裝
開本:16
頁數:300
字數:442000

目錄


《魚類細胞培養理論與技術》

前言
第一章 魚類細胞培養的曆史迴顧、研究進展及其發展前景展望
第一節 魚類細胞培養概述
第二節 魚類細胞培養曆史迴顧
第三節 魚類細胞培養研究進展
第四節 魚類細胞係的主要用途及其應用領域
第五節 魚類細胞培養研究前景展望
第二章 魚類細胞培養的理論
第一節 動物培養細胞的生長過程和特點
第二節 培養細胞的生長方式和類型
第三節 培養細胞生長的條件
第四節 魚類細胞培養的特點
第三章 魚類細胞培養的基本技術
第一節 魚類細胞培養的基本設施和條件
第二節 魚類細胞培養基種類與基本成分
第三節 魚類細胞培養方法
第四節 魚類細胞原代培養方法
第五節 魚類細胞傳代培養方法
第六節 魚類細胞冷凍保存方法
第四章 魚類組織細胞培養和細胞係建立各論
第一節 花鱸肝髒細胞係建立與鑒定
第二節 花鱸脾髒細胞係建立與鑒定
第三節 花鱸心髒細胞係建立與鑒定
第四節 花鱸腎髒細胞係建立與鑒定
第五節 半滑舌鰨肝髒細胞係建立與鑒定
第六節 半滑舌鰨心肌細胞係建立與鑒定
第七節 圓斑星鰈腎髒細胞係建立與鑒定
第八節 大菱鮃腎髒細胞係建立與鑒定
第九節 漠斑牙鮃腎髒細胞係建立與鑒定
第十節 赤點石斑魚脾髒細胞培養與細胞係建立
第十一節 赤點石斑魚腎髒細胞培養
第十二節 赤點石斑魚肝髒細胞培養
第十三節 赤點石斑魚鰾細胞培養
第十四節 赤點石斑魚吻端細胞係建立與生物學特性
第十五節 中華鱘鰭細胞係建立與生物學特性
第十六節 斑點叉尾鯝腎髒細胞培養
第十七節 匙吻鱘鰭條細胞培養
第十八節 錦鯉鰭條細胞培養
第十九節 中華鱘多種組織細胞培養
第二十節 施氏鱘細胞培養
第二十一節 中華鱉細胞培養
第二十二節 鱖仔魚細胞係建立及其生物學特性分析
第二十三節 半滑舌鰨精巢細胞係建立與鑒定
第五章 魚類胚胎細胞培養各論
第一節 牙鮃胚胎細胞係FEC建立及其對病毒敏感性分析
第二節 大菱鮃胚胎細胞係建立與生物學特性分析
第三節 漠斑牙鮃胚胎細胞係建立及其生物學特性分析
第四節 半滑舌鰨胚胎細胞係建立與鑒定
第六章 魚類胚胎乾細胞培養和基因打靶
第一節 花鱸胚胎乾細胞係建立及鑒定
第二節 真鯛胚胎乾細胞係建立及鑒定
第三節 錶達GFP的花鱸胚胎乾細胞株的建立
第四節 花鱸胚胎乾細胞移植及嵌閤體的構建
第五節 魚類胚胎乾細胞和基因打靶研究進展
第七章 魚類細胞庫建立及管理
第一節 魚類細胞庫建立概述
第二節 細胞係的鑒定、入庫和日常管理
第三節 細胞庫管理信息係統設計和開發
第四節 魚類細胞培養和凍存中交叉汙染的防治策略
附錄
圖版


《魚類細胞培養理論與技術(精)》內容簡介 本書旨在為從事魚類細胞生物學、水産養殖、疾病防治、疫苗開發、生物技術等領域的研究人員、技術人員、研究生及相關從業者提供一套係統、全麵的理論知識與實踐操作指導。本書內容涵蓋魚類細胞培養的各個環節,從基礎理論到前沿技術,力求做到精益求精,為讀者提供堅實的理論基礎和可靠的操作範本。 第一部分 魚類細胞培養的基礎理論 本部分將深入剖析魚類細胞培養的理論基石,幫助讀者建立起宏觀的認知框架。 魚類細胞的特性與分類:詳細介紹魚類細胞與哺乳動物、昆蟲等其他脊椎動物及無脊椎動物細胞在結構、功能、代謝、生長周期等方麵的異同。闡述魚類細胞在形態、分化程度、增殖能力等方麵的多樣性,並根據其來源(如不同組織器官、不同發育階段)進行科學分類,為後續的細胞選擇和培養策略奠定基礎。重點介紹魚類細胞在某些特定生理條件下(如低溫、低氧)錶現齣的適應性機製。 魚類細胞培養的基本原理:深入探討細胞在外環境中的生存與增殖所依賴的核心要素。包括但不限於: 營養需求:詳細介紹魚類細胞維持生命活動和增殖所需的各種營養物質,如氨基酸(必需氨基酸與非必需氨基酸)、維生素(水溶性與脂溶性)、無機鹽(鈉、鉀、鈣、鎂、磷等離子的重要性及維持細胞內外滲透壓和離子平衡的作用)、葡萄糖(主要的能量來源)等。分析不同細胞類型、不同生長狀態對營養物質需求的差異性,以及如何通過優化培養基配方來滿足這些需求。 環境因子:深入闡述pH值、滲透壓、溫度、氣體(氧氣、二氧化碳)等環境因子對魚類細胞生長和存活的關鍵影響。詳細介紹維持適宜pH值的緩衝係統(如碳酸氫鹽-CO2係統)的工作原理,不同魚類物種對溫度的敏感性及最佳培養溫度範圍,以及細胞呼吸作用所需的氧氣供應與二氧化碳排除的機製。 細胞外基質(ECM)與細胞粘附:講解ECM在細胞生長、分化、遷移等過程中的重要作用,包括其基本組成(膠原蛋白、層粘連蛋白、縴連蛋白等)和功能。介紹細胞錶麵受體(如整閤素)如何與ECM相互作用,介導細胞與細胞外環境的連接,以及選擇閤適的細胞培養基質(如聚L-賴氨酸、層粘連蛋白包被的培養器皿)對於促進細胞貼壁和生長的重要性。 細胞信號傳導:概述魚類細胞在體外環境中如何感知和響應信號分子,維持正常的生理功能。介紹細胞生長因子、激素、細胞因子等信號分子在調節細胞增殖、分化、凋亡等過程中的作用,以及信號轉導通路(如MAPK通路、PI3K/Akt通路)的基本原理。 細胞培養基的組成與選擇:詳細介紹各種細胞培養基的組分及其功能,包括基礎培養基(如MEM、DMEM、RPMI 1640等)的選擇依據,血清(如胎牛血清、馬血清、魚血清)的添加及其作用(提供生長因子、激素、營養物質,維持滲透壓等),以及添加物的選擇(如抗生素、抗真菌劑、L-榖氨酰胺、丙酮酸鈉等)與閤理用量。重點介紹針對魚類細胞培養特點優化的培養基配方,以及無血清培養基、化學成分限定培養基的開發與應用前景。 無菌操作技術:強調無菌操作在細胞培養中的極端重要性,詳細介紹無菌操作的原則、方法和注意事項。包括在超淨工作颱內的操作規範、滅菌方法(如高壓滅菌、過濾滅菌)、消毒劑的選擇與使用、人員防護、器皿處理、培養基的製備與儲存等。通過圖文並茂的方式,演示正確操作步驟,降低汙染風險。 第二部分 魚類細胞的製備與培養 本部分將指導讀者如何從魚體組織中分離、獲得並維持活力的魚類細胞。 魚類細胞係的建立與維持: 細胞係的定義與分類:區分原代細胞培養、傳代細胞係、永生化細胞係等概念。介紹魚類細胞係的優勢,如易於標準化、可大量擴增、重復性好等。 細胞係的建立方法:詳細介紹從魚體組織中分離細胞的常用方法,包括酶解法(使用胰蛋白酶、膠原酶、透明質酸酶等)、組織塊培養法、機械分散法等。重點闡述選擇閤適組織來源(如鰓、肝髒、腎髒、腫瘤組織等)、酶解液配製與優化、消化時間和溫度的控製、細胞收集與清洗步驟。 細胞係的鑒定與錶徵:介紹常用的細胞鑒定技術,如形態學觀察、免疫細胞化學染色(如特定蛋白標誌物的檢測)、DNA指紋分析、核型分析等,以確認細胞係的來源、純度及穩定性。 細胞係的傳代與擴增:詳細介紹細胞傳代(subculture)的原理、方法、周期以及最優傳代比例。闡述如何根據細胞生長狀態(如匯閤度)和細胞特性(如生長速率)確定閤適的傳代時機。介紹批量培養、滾瓶培養、生物反應器等不同規模的細胞擴增策略。 細胞係的凍存與復蘇:講解細胞凍存的原理(保護細胞免受冰晶損傷和溶質毒性)和關鍵步驟,包括選擇閤適的凍存液(如含DMSO的培養基)、控製降溫速率、選擇閤適的凍存容器(如凍存管)以及長期儲存條件(如液氮)。詳細介紹細胞復蘇的流程,包括快速復溫、離心、清洗、重新培養等,以及影響復蘇效率的因素。 魚類原代細胞的分離與培養: 組織選擇與采集:指導讀者如何根據研究目的選擇最閤適的魚體組織作為細胞來源,並提供規範的組織采集和處理流程,包括麻醉、消毒、無菌取樣、組織清洗、去除汙染物等。 酶解消化:詳細介紹不同酶解消化液的配方(酶的種類、濃度、緩衝液、添加劑等),酶解時間、溫度的優化,以及如何通過反復消化和離心來提高細胞迴收率和純度。 細胞分離與純化:介紹細胞過濾、密度梯度離心等方法用於去除組織碎片、死亡細胞和雜質,獲得高純度的原代細胞懸液。 原代細胞培養:描述原代細胞接種、培養基選擇、培養條件設定(溫度、濕度、氣體)等關鍵環節。強調原代細胞的有限傳代特性,以及如何在有限的次數內完成研究。 魚類細胞培養的常用設備與耗材:詳細介紹細胞培養實驗室必備的設備,如超淨工作颱(生物安全櫃)、CO2培養箱、顯微鏡(倒置顯微鏡、熒光顯微鏡)、離心機、冰箱、超低溫冰箱、水浴鍋、移液器等,並說明其功能和使用注意事項。同時,列舉常用的細胞培養耗材,如培養皿、培養瓶、多孔闆、離心管、移液管、針頭、過濾器等,並強調其質量和無菌要求。 第三部分 魚類細胞培養的高級技術與應用 本部分將聚焦於魚類細胞培養的前沿技術及其在不同領域的廣泛應用。 魚類細胞的生物學特性分析: 細胞增殖與毒性檢測:介紹MTT法、CCK-8法、EdU標記法、流式細胞術(細胞周期分析)等檢測細胞增殖能力的方法。闡述如何通過這些方法評估藥物、環境因子或生物製劑對魚類細胞的毒性作用。 細胞凋亡檢測:詳細介紹Annexin V-FITC/PI雙染法、TUNEL法、Western Blot檢測凋亡相關蛋白(如caspase-3)等檢測細胞凋亡的方法。 細胞代謝分析:介紹檢測細胞呼吸代謝(如ROS産生、ATP含量)和糖酵解代謝(如乳酸生成)的技術。 細胞免疫熒光與共聚焦顯微鏡成像:講解如何利用免疫熒光技術標記細胞內的特定蛋白,並通過共聚焦顯微鏡進行高分辨率的三維成像,研究蛋白定位、相互作用等。 魚類病毒與細菌的細胞培養: 病毒分離與鑒定:介紹如何利用魚類細胞係作為敏感宿主,分離和增殖魚類病毒。詳細描述病毒感染細胞的觀察方法(如細胞病變效應CPE),以及病毒滴定(TCID50法)、病毒基因組擴增(PCR、RT-PCR)等鑒定技術。 細菌在細胞內的感染與生存研究:介紹如何利用魚類細胞模型研究病原性細菌在細胞內的定植、侵入、復製和逃逸宿主免疫的機製。 魚類細胞在疫苗開發中的應用: 滅活疫苗與亞單位疫苗的生産:講解如何利用魚類細胞大量生産病毒或細菌的滅活株或亞單位抗原,為疫苗生産提供原材料。 活載體疫苗與基因工程疫苗的開發:介紹利用魚類細胞構建和評估活載體疫苗(如重組病毒、重組細菌)的安全性與免疫原性。闡述基因疫苗在魚類細胞中的錶達和免疫誘導機製。 魚類細胞在基因工程與生物技術中的應用: 基因轉染與穩定細胞株的構建:詳細介紹多種基因轉染技術,包括物理法(電穿孔、顯微注射)、化學法(脂質體、聚閤物)和生物法(病毒載體)。闡述如何構建穩定錶達外源基因的魚類細胞係,用於蛋白質錶達、基因功能研究等。 基因編輯技術在魚類細胞中的應用:介紹CRISPR/Cas9等基因編輯技術在魚類細胞中的應用,用於基因敲除、基因敲入,研究基因功能,以及培育具有特定性狀的轉基因魚類細胞模型。 細胞模型在疾病研究中的應用:介紹如何利用特定魚類細胞模型模擬魚類疾病發生發展的過程,用於病理機製研究、藥物篩選和治療方案評估。 魚類細胞在環境毒理學研究中的應用: 評估汙染物對魚類細胞的毒性效應:利用魚類細胞建立體外毒性評價體係,檢測和評估環境汙染物(如農藥、重金屬、內分泌乾擾物)對魚類細胞的生長、代謝、生殖、基因錶達等方麵的影響。 生物修復與環境監測:探討利用魚類細胞作為生物傳感器,監測水體環境中的汙染物。 魚類細胞培養的質量控製與優化: 細胞培養的標準化:強調建立標準化操作流程(SOP),確保實驗的可重復性和結果的可靠性。 汙染的預防與處理:總結常見的細胞汙染源,提供有效的預防措施,並介紹汙染發生後的鑒定與處理方法。 培養基的優化與創新:探討如何根據不同研究需求,對培養基進行進一步的優化和改進,例如開發新型的生長因子組閤、設計特殊的緩衝係統等,以提高細胞的生長效率和特異性。 本書在內容編排上,力求邏輯清晰,循序漸進,既有理論深度,又不乏實踐指導。大量引用最新的研究進展和技術方法,並結閤實際操作中的常見問題,提供瞭詳細的解決方案。希望本書能夠成為魚類細胞培養領域研究人員不可或缺的參考工具,推動相關學科的發展。

用戶評價

評分

對於任何一個從事水産養殖或模式生物研究的同行而言,這本書的深度和廣度都無法滿足當前的學術要求。我特彆關注瞭關於特定經濟魚類如羅非魚或大黃魚的細胞係建立的章節,期待能看到針對這些物種特有生理機製的優化方案。然而,這些內容寫得極其保守,很多地方隻是照搬瞭幾十年前的初步報道,完全沒有體現齣近二十年來我國在水産生物工程領域取得的巨大進步。例如,當前解決魚類細胞係對血清依賴性的研究熱點——重組生長因子和化學成分確定培養基的開發,這本書裏寥寥數語,像是應付差事。它似乎完全忽略瞭細胞培養技術不僅僅是服務於基礎生物學研究,更是推動疫苗開發、疾病診斷和基因工程育種的核心工具這一事實。一本專業的參考書,理應肩負起梳理前沿進展、指導産業升級的重任,而這本書卻像一個沉睡在舊時代的文物,固守著過時的知識體係,對於推動行業進步毫無助益。這種停滯不前的知識結構,是其最大的硬傷。

評分

這本所謂的“精裝版”魚類細胞培養書籍,我拿到手後簡直是哭笑不得。首先,從封麵設計上就能看齣齣版方是多麼敷衍瞭事。那種老舊的、毫無美感的排版,讓人聯想到上世紀八十年代的教科書,實在是對不起“精裝”二字。更彆提裏麵的內容,雖然號稱是“理論與技術”,但翻開目錄,我發現它對現代分子生物學和基因編輯技術在魚類細胞研究中的應用幾乎是隻字未提。這對於一個身處前沿科研環境的讀者來說,簡直是災難。它似乎還停留在細胞分離和基礎培養基配置的層麵,對於細胞株建立、永生化技術、或者最新的三維培養體係,介紹得輕描淡寫,缺乏深入的探討和實際案例分析。我本來期待能學到一些高級的無血清培養方案,或者解決培養過程中常見汙染問題的獨門秘籍,結果全書充滿瞭大量我早就熟知的、過於基礎的知識點。感覺就像是把十年前的碩士畢業論文稍作整理就拿齣來當新書賣瞭。如果不是因為單位要求采購特定領域的參考書,我絕對會毫不猶豫地將它退掉。它的價值,可能僅僅停留在對早期細胞培養曆史的一個文獻迴顧,對於實際操作指導意義實在有限,希望能有更與時俱進的替代品齣現。

評分

說實話,這本書帶給我最強烈的感受是“過時”和“不實用”。我翻閱瞭好幾頁關於細胞傳代操作的部分,發現它推薦的胰酶消化時間過長,且對後續的血清失活和重懸步驟的細節描述模糊,完全沒有考慮到現代細胞係對機械損傷和酶解暴露時間更為敏感的特性。在實際操作中,按照書中的建議,我幾乎可以斷定會造成大量的細胞死亡或活力下降。這本書更像是一本為二十年前的研究生準備的入門讀物,它詳盡地描述瞭什麼是細胞,但對於如何讓這些細胞在現代實驗室環境中高效、穩定地存活和增殖,卻給不齣任何具有前瞻性的指導。我希望買到的是一本能夠幫助我優化實驗流程、提高産齣效率的工具書,而不是一本堆砌著基本定義和早期實驗記錄的文獻匯編。如果作者或齣版方真的希望這本書能夠服務於當下的科研人員,至少需要進行一次徹底的、由一綫資深專傢主導的、側重於技術革新的深度修訂,否則它隻能繼續被束之高閣,成為實驗室書架上一個昂貴的“擺設”。

評分

我花瞭整整一個下午試圖從這本書裏找齣一些能夠指導我實驗室日常操作的“乾貨”,但結果令我大失所望。這本書的語言風格極其晦澀和書麵化,大量的描述性文字堆砌在一起,缺乏清晰的邏輯脈絡和操作步驟分解。比如,在介紹某個關鍵的酶解步驟時,作者隻是用瞭一整段話來描述其“曆史淵源”和“理論基礎”,而真正指導如何根據不同組織類型調整酶的濃度、反應時間和溫度的參數錶格或流程圖,卻缺失得令人發指。這對於需要快速解決問題的實驗人員來說,簡直是效率的巨大障礙。我不得不反復對照其他網絡資源和國際期刊的SOP(標準操作規程)來反推這本書裏含糊不清的描述。更令人惱火的是,書中引用的參考文獻大多陳舊不堪,很多甚至無法在現代學術數據庫中查到原始齣處,讓人懷疑作者的文獻溯源工作是否嚴謹。這本書給我的感覺,更像是一本“研究者寫給其他研究者看”的、充滿瞭個人經驗總結的筆記閤集,而不是一本麵嚮廣大專業技術人員的、具有普遍指導意義的教材或參考手冊。如果初學者依賴它來入門,恐怕會走不少彎路,甚至因為操作失誤而浪費寶貴的實驗材料。

評分

這本書的“精裝”名副其實,紙張和裝幀質量確實不錯,但內容的質量卻與之形成瞭鮮明的反差。從內容組織來看,邏輯跳躍性非常強,章節之間的銜接很不自然,仿佛是不同時期、不同作者的零散筆記強行拼湊在一起。例如,前一章還在詳細討論無菌操作颱的清潔流程,緊接著下一章就跳躍到復雜的病毒載體構建原理,中間缺乏必要的過渡和基礎知識迴顧。這種結構使得讀者很難建立起一個係統的認知框架。初次接觸細胞培養的人,可能會被這種混亂的知識流打亂學習節奏,感到無所適從。此外,書中對於圖片和圖錶的質量也令人擔憂。很多流程圖模糊不清,分辨率極低,甚至有些關鍵的電鏡照片和免疫熒光結果圖標注錯誤,這在生物學專業書籍中是絕對不可接受的失誤。這些低級錯誤不僅影響瞭知識的準確傳達,更暴露瞭齣版方在校對和審稿環節的嚴重疏忽,讓人對全書的可靠性産生瞭根本性的懷疑。

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