臨床分子生物學檢驗技術實驗指導 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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王曉春，趙春艷，王誌剛 編

圖書標籤:

• 臨床分子生物學
• 分子生物學檢驗
• 醫學檢驗
• 實驗指導
• 臨床醫學
• 生物技術
• 基因檢測
• PCR技術
• 核酸檢測
• 實驗室技術

齣版社： 人民衛生齣版社

ISBN：9787117203050

版次：1

商品編碼：11701357

包裝：平裝

叢書名： “十二五”普通高等教育本科國傢級規劃教材配套教材 ， ，

開本：16開

齣版時間：2015-04-01

用紙：膠版紙

頁數：154

字數：250000

正文語種：中文

內容簡介

　　《臨床分子生物學檢驗技術實驗指導》包括32個實驗，內容分為七大部分：分子生物學檢驗技術實驗室介紹；核酸的分離與純化；核酸擴增技術；核酸分子雜交技術；分子剋隆技術；其他分子檢驗技術；創新性實驗、設計性實驗及綜閤性實驗。各校可根據自身條件、要求的不同進行取捨和組閤，建議實驗教學時數為30-60學時。
　　《臨床分子生物學檢驗技術實驗指導》具有以下特點：①注重基礎知識和技能的訓練，從微量移液器的使用到分子生物學實驗室的規範操作及基本實驗，從試劑配製到具體操作，力求詳細，方便教學；②加強有臨床應用價值或應用前景的技術及項目的介紹，如PCR技術、基因突變的檢測等；③增加刨新性實驗、設計性實驗及綜閤性實驗，增強對學生創新能力和綜閤素質的培養。有些綜閤性、設計性實驗來自科研課題，內容新、方法先進，有利於學生掌握新知識、新技術。

目錄

第一部分 分子生物學檢驗技術實驗室
一、分子生物學檢驗技術實驗須知
二、分子生物學檢驗技術實驗室介紹
三、分子生物學檢驗技術常用儀器介紹
四、分子生物學實驗室生物安全

第二部分 核酸的分離與純化
實驗1 真核基因組DNA的分離與純化
實驗2 真核細胞mRNA的分離與純化
實驗3 質粒DNA的提取
實驗4 核酸的鑒定

第三部分 核酸擴增技術
實驗5 聚閤酶鏈反應
實驗6 PCR-RF1P檢測綫粒體DNAA3243G異質性突變
實驗7 等位基因特異性擴增法檢測結核分枝杆菌rpoB基因突變
實驗8 TRAP一銀染法檢測端粒酶活性
實驗9 多重PCR檢測測a-地中海貧血基因缺失
實驗10 PCR-SSCP檢測苯丙酮尿癥苯丙氨酸羥化酶基因外顯子7突變
實驗11 實時熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒（HBv）核酸
實驗12 逆轉錄．聚閤酶鏈反應檢測甘油醛-3-磷酸脫氫酶mRNA

第四部分 核酸分子雜交技術
實驗13 探針的製備
實驗14 DNA分子雜交
實驗15 RNA分子雜交
實驗16 熒光原位雜交
實驗17 反嚮斑點雜交法檢測B-地中海貧血

第五部分 分子剋隆技術
實驗18 DNA的限製性內切酶酶切反應
實驗19 目的片段的連接
實驗20 感受態細胞的製備及重組子轉化
實驗21 重組子的鑒定

第六部分 其他分子檢驗技術
實驗22 真核細胞基因轉染技術
實驗23 Western印跡
實驗24 雙嚮聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗25 H1A基因分型
實驗26 乙型肝炎病毒基因分型(芯片法)
實驗27 PCR-熒光探針法檢測CYP2C19基因多態性

第七部分 創新性實驗、設計性實驗及綜閤性實驗
實驗28 采用導流雜交基因芯片技術進行人乳頭瘤病毒基因分型
實驗29 采用多重連接依賴探針擴增技術檢測抗肌萎縮蛋白基因突變
實驗30 人肝癌相關microRNA一21的定量檢測
實驗31 熒光素酶報告基因的製備
實驗32 基因重組
附錄 分子生物學檢驗技術實驗中常用試劑和緩衝液的配製

精彩書摘

　　《臨床分子生物學檢驗技術實驗指導》：
　　三、分子生物學檢驗技術常用儀器介紹（一）微量移液器微量移液器（pipette）是分子生物學中最常用的計量儀器。其工作原理是通過內部密封的不銹鋼活塞和彈簧，用手指按壓和放鬆按鈕來吸取和排齣液體。在使用移液器的過程中，應注意以下幾方麵：①必須根據設計容量選用適當型號的移液器，調整數輪的讀數不得超過其標稱的容量範圍，否則會損壞移液器；②吸取不同類彆的溶液應更換吸頭，防止試樣之間交叉汙染，不同個體的體液標本也應更換吸頭，否則會嚴重影響檢驗結果；③新吸頭在使用前可吸排溶液幾次，浸漬吸頭以消除測量誤差；④移液器吸液後嚴禁倒置、平放，以免溶液流入內腔，損壞活塞；⑤移液器不用時應存放在專用的支架上，不得任意放置；⑥長時間不用或剛取齣的新移液器應輕輕用手推動按鈕上下按壓幾次，再進行正常使用；⑦注意正確讀數，目前有的移液器是電子顯示，一般難以齣錯，但對於手動調節的應特彆注意。吸取液體時隻能輕按第一擋，排齣液體時需要按到第二擋；吸取液體時不可快速吸取。（二）水純化裝置分子生物學實驗對用水質量要求極高，器皿需經酸泡和自來水洗淨後用雙蒸水漂洗數次，配製各種溶液更是要求用三蒸水或超純水。水純化裝置主要包括：單蒸器、石英玻璃雙蒸餾器、離子交換器及超純水裝置等。（三）離心機離心機是分子生物學實驗中最常用的一類儀器，主要用於收集和分離細胞、細胞器和生物大分子等。實驗用離心機可按其轉速分為低速離心機（普通離心機）、高速離心機和超速離心機三種類型。
　　在分子生物學實驗中應用最多的是颱式高速離心機，一般分為常溫和冷凍兩種，最大轉速一般在12000～20000g，這類儀器特彆適閤於生物大分子在Eppendorf管內微量操作後的處理，最少可供0.05ml樣品的離心。
　　（四）電泳裝置
　　電泳裝置由電泳儀和電泳槽兩部分組成。它主要用於檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特徵，此外它還是分離、純化、迴收和濃縮樣品的主要工具。
　　1.電泳儀它是作為電泳時的外加電源設備，將220V交流電整流後通過穩壓器，它既能輸齣穩定的電流，又能輸齣穩定的電壓，起到在被分離樣品兩端加外接電場的作用。常見的電泳儀有常壓電泳儀（輸齣電壓為0～500V，電流0～150mA）、中壓電泳儀（輸齣電壓400～1000V）、高壓電泳儀（輸齣電壓高於lkV），另外還有一些特殊的電泳儀，如毛細管電泳儀、脈衝電場凝膠電泳儀、轉移電泳儀等。
　　2.電泳槽電泳槽是電泳的主要部件，是樣品分離的場所。槽內裝有電極、緩衝液槽、電泳支持架等，有的還有散熱裝置如循環水等。電泳槽種類很多，有平臥式、垂直闆式、圓柱式、立闆式、懸掛式等。
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前言/序言

《現代遺傳學前沿探索》 內容梗概： 《現代遺傳學前沿探索》是一部深度剖析當代遺傳學研究最新進展的學術著作，旨在為遺傳學領域的研究人員、高等院校師生以及對生命科學前沿充滿好奇的讀者提供一份全麵、權威且具有前瞻性的導覽。本書並非泛泛而談，而是聚焦於當前遺傳學領域最活躍、最具創新性的幾個方嚮，通過精選的案例分析、理論闡釋和技術解讀，展現齣遺傳學研究的蓬勃生機與無限可能。 本書共分為八個章節，每一章節都代錶著遺傳學研究的一個重要維度或新興熱點。 第一章：基因組編輯技術的革命與倫理考量 本章深入探討瞭CRISPR-Cas9等基因組編輯技術的原理、發展曆程及其在基礎研究和疾病治療領域的顛覆性應用。從早期鋅指核酸酶（ZFNs）和轉錄激活因子樣效應物核酸酶（TALENs）的誕生，到CRISPR-Cas9係統的橫空齣世，本書詳細梳理瞭基因組編輯技術從概念到實踐的演進。重點闡述瞭CRISPR-Cas9係統的工作機製，包括guide RNA的設計、Cas9蛋白的切割功能，以及不同變體（如Cas12、Cas13）的應用。 在應用方麵，本書詳細介紹瞭基因組編輯技術如何被用於精確地修改基因序列，從而研究基因功能、構建疾病模型（如癌癥、遺傳性疾病模型）、開發新型基因療法（如鐮刀形貧血癥、囊性縴維化治療的初步探索）。此外，本章也並未迴避基因組編輯技術所帶來的嚴峻倫理挑戰，包括對生殖係基因編輯的擔憂、潛在的脫靶效應、基因隱私問題以及社會公平性等議題，並引用瞭相關國際組織和科學傢的觀點，引發讀者對這項強大技術的深層思考。 第二章：錶觀遺傳調控的網絡解析 本章聚焦於錶觀遺傳學，這一研究領域正日益揭示基因功能調控的復雜性。本書詳細闡述瞭DNA甲基化、組蛋白修飾（如乙酰化、甲基化、磷酸化）以及非編碼RNA（microRNAs, lncRNAs）等關鍵錶觀遺傳機製。通過對這些調控元件的深入解析，讀者將瞭解到它們如何影響基因轉錄、染色質結構以及細胞分化和發育。 本書重點介紹瞭多種用於解析錶觀遺傳調控網絡的技術，包括ChIP-seq（染色質免疫沉澱測序）、WGBS（全基因組亞硫酸氫鹽測序）、RNA-seq（RNA測序）等，並結閤最新研究成果，展示瞭如何通過整閤分析這些多組學數據，來繪製齣復雜的錶觀遺傳調控圖譜。此外，本章還探討瞭錶觀遺傳學在癌癥、神經退行性疾病、衰老等重大疾病發生發展中的作用，並介紹瞭一些靶嚮錶觀遺傳修飾的藥物研發進展。 第三章：單細胞測序與異質性解析 單細胞測序技術的興起，極大地推動瞭我們對生物係統異質性理解的深入。本章將全麵介紹單細胞RNA測序（scRNA-seq）、單細胞ATAC測序（scATAC-seq）以及單細胞DNA測序（scDNA-seq）等關鍵技術。本書詳細講解瞭這些技術如何在單個細胞水平上捕捉基因錶達、染色質可及性或基因組突變信息，從而揭示細胞群體中潛藏的細微差彆。 本書著重分析瞭單細胞測序數據分析的挑戰與策略，包括細胞簇識彆、細胞類型鑒定、軌跡推斷以及細胞間相互作用的預測。通過展示研究人員如何利用單細胞技術來解析腫瘤微環境的復雜性、追蹤胚胎發育過程中細胞譜係的分化、識彆免疫細胞的亞群及其功能狀態，本書生動地說明瞭這項技術在腫瘤學、免疫學、發育生物學等多個領域的應用潛力。 第四章：宏基因組學與微生物組的生態洞察 宏基因組學以前所未有的視角，讓我們能夠窺探地球上數量龐大的微生物群落。本章深入探討瞭宏基因組學研究方法，包括DNA提取、文庫構建、高通量測序以及生物信息學分析。本書詳細介紹瞭如何通過對環境樣本（如土壤、水體、腸道）中的所有DNA進行測序，來識彆微生物的組成、功能潛力以及它們之間的相互作用。 本書重點關注瞭人體微生物組的研究，闡述瞭腸道、皮膚、口腔等部位微生物群落的組成及其對宿主健康的影響。通過整閤宏基因組學與宿主基因組學、代謝組學等數據，本書展示瞭如何揭示微生物與宿主生理、免疫、營養吸收以及疾病（如炎癥性腸病、肥胖、精神疾病）之間的復雜關聯。此外，本章還展望瞭宏基因組學在環境監測、生物修復以及農業應用等方麵的廣闊前景。 第五章：閤成生物學：設計與構建生命係統 閤成生物學是一門交叉學科，緻力於通過工程化的方法來設計、構建和改造生物係統。本章將介紹閤成生物學的基本原理，包括基因綫路設計、標準生物部件的應用以及邏輯門電路在生物係統中的實現。本書深入闡述瞭如何利用模塊化設計和工程化思維，來創造齣具有全新功能的生物體或生物器件。 本書詳細展示瞭閤成生物學在多個領域的創新應用，包括設計能夠生産藥物或生物燃料的工程菌株、開發用於疾病診斷的生物傳感器、構建能夠進行環境修復的微生物係統，以及探索生命起源和演化的基本問題。本章還討論瞭閤成生物學所麵臨的技術瓶頸和安全風險，以及相關的政策法規和倫理框架的建設。 第六章：長鏈非編碼RNA（lncRNAs）的功能網絡解析 長鏈非編碼RNA（lncRNAs）在基因調控中扮演著越來越重要的角色，盡管它們本身不編碼蛋白質，卻能以多種方式影響基因錶達。本章將深入解析lncRNAs的種類、結構及其在細胞核和細胞質中的定位。本書詳細闡述瞭lncRNAs如何通過招募蛋白復閤物、改變染色質結構、影響mRNA穩定性或作為分子支架等機製，來調控基因轉錄、轉錄後修飾以及翻譯過程。 本書重點介紹瞭當前解析lncRNA功能網絡的關鍵技術，如RNA-seq、RNA-FISH（熒光原位雜交）、RNA-IP（RNA免疫沉澱）等，並結閤最新的研究案例，展示瞭lncRNAs在腫瘤發生、細胞分化、發育調控以及免疫應答等過程中的核心作用。本章還探討瞭lncRNAs作為疾病生物標誌物和潛在藥物靶點的應用前景。 第七章：基於AI的生物信息學與基因組學數據分析 人工智能（AI）和機器學習（ML）正在深刻地改變生物信息學和基因組學數據的分析方式。本章將探討AI在基因組學數據解讀中的前沿應用。本書詳細介紹瞭如何利用深度學習模型來預測基因功能、識彆疾病相關突變、注釋基因組區域、預測蛋白質結構以及分析復雜的基因調控網絡。 本書將展示AI在以下方麵的具體應用：例如，利用神經網絡分析大量的全基因組測序數據，以識彆與特定疾病（如癌癥、罕見病）相關的基因組變異；利用機器學習算法分析單細胞轉錄組數據，以實現更精確的細胞類型分類和軌跡推斷；利用自然語言處理（NLP）技術從海量科研文獻中提取生物學信息，加速科學發現。本章還討論瞭AI在生物信息學領域麵臨的挑戰，包括數據偏差、模型可解釋性以及算法的泛化能力。 第八章：精準醫療的遺傳學基石與未來展望 精準醫療，即根據個體的遺傳背景、環境因素和生活方式來定製化的疾病預防和治療方案，正成為現代醫學發展的重要方嚮。本章將探討遺傳學在精準醫療中的關鍵作用。本書詳細介紹瞭如何利用基因組學、轉錄組學、蛋白質組學等技術，來揭示個體間的遺傳差異，並將其與疾病易感性、藥物反應性以及治療效果聯係起來。 本書重點闡述瞭精準醫療在腫瘤治療、罕見病診斷、藥物基因組學以及疾病風險預測等方麵的應用。例如，通過基因測序分析腫瘤基因突變，為患者選擇最有效的靶嚮治療藥物；通過全外顯子組測序，診斷罕見的遺傳性疾病；通過藥物基因組學，預測個體對某些藥物的反應，避免不良反應。本章還展望瞭精準醫療的未來發展趨勢，包括多組學數據整閤、AI驅動的決策支持以及基因編輯技術的臨床應用，並強調瞭數據隱私、倫理和社會公平性等問題的重要性。 《現代遺傳學前沿探索》是一部內容充實、論述嚴謹、兼具理論深度與實踐指導意義的著作。它不僅為讀者呈現瞭當前遺傳學領域最激動人心的研究成果，更啓發瞭對未來生命科學發展方嚮的思考。本書的每一章節都力求做到邏輯清晰、條理分明，通過嚴謹的學術語言和豐富的實例，帶領讀者穿越現代遺傳學研究的層層迷霧，領略生命奧秘的無窮魅力。

評分☆☆☆☆☆

我特彆欣賞這本書在數據分析和結果解讀部分的處理方式。很多技術書籍往往會把這一部分寫得非常籠統，但這本書卻給瞭我耳目一新的感覺。它詳細介紹瞭如何對PCR産物、基因測序結果、免疫印跡等實驗數據進行初步的處理和分析，包括常用的統計學方法、圖錶製作以及結果的圖示化展示。更關鍵的是，它深入剖析瞭如何根據實驗結果來判斷一個分子生物學指標的臨床意義，比如如何解讀基因突變報告，如何評估PCR擴增的特異性和靈敏度，以及如何識彆假陽性或假陰性結果。書中提供瞭大量的實際病例分析，將理論知識與臨床診斷緊密聯係起來，讓我能夠將學到的技術應用到實際的臨床情境中去。比如在解讀一個基因檢測報告時，它會告訴你這個基因突變可能導緻哪些疾病，治療上有什麼樣的選擇，預後如何等等，這種“學以緻用”的引導，對我這樣希望將理論知識轉化為實踐能力的讀者來說，非常有價值。

評分☆☆☆☆☆

讓我感到驚喜的是，這本書在“疑難解答”和“常見問題分析”部分所花費的心思。在學習過程中，我總會遇到一些難以理解的細節或者操作上的睏惑，而這本書恰恰滿足瞭我的這些需求。它收集瞭許多臨床分子生物學檢驗中經常齣現的問題，並給齣瞭詳細的解答和解決方案。例如，在進行核酸提取時，如何處理復雜的樣品基質，如何提高核酸的純度和産量；在設置PCR反應時，如何優化退火溫度和引物濃度，如何避免非特異性擴增；在進行數據分析時，如何應對批次效應，如何確保結果的可重復性等等。作者用一種非常貼近實際操作的口吻，將這些“過來人”的經驗總結下來，避免瞭我們在實踐中走彎路。這種“前人栽樹，後人乘涼”的智慧，讓我能夠更高效地掌握技術，並對潛在的問題有預判和應對能力，大大提升瞭我的學習效率和信心。

評分☆☆☆☆☆

這本書最讓我印象深刻的是，它不僅僅是一本技術手冊，更是一本培養臨床思維的工具書。在講解每一項技術時，作者都非常注重將其與實際的臨床應用聯係起來，詳細闡述瞭該技術在疾病診斷、病情監測、治療方案選擇、預後評估等方麵的作用。例如，在介紹基因突變檢測時，它會詳細說明不同基因突變與不同癌癥之間的關聯，以及這些檢測結果如何指導靶嚮治療。在討論傳染病病原體檢測時，它會分析不同檢測方法的靈敏度和特異性，以及如何根據檢測結果來判斷感染狀態和製定治療方案。書中還穿插瞭一些案例研究，通過分析真實的臨床病例，來展示分子生物學檢驗技術是如何在診斷和治療過程中發揮關鍵作用的。這種以臨床需求為導嚮的講解方式，讓我不僅學會瞭操作，更理解瞭技術的價值和意義，也讓我對分子生物學在現代醫學中的地位有瞭更深刻的認識，非常有助於我理解和應用相關知識。

評分☆☆☆☆☆

我最近在翻閱一本名為《臨床分子生物學檢驗技術實驗指導》的書，盡管書名聽起來很專業，但它提供的內容比我預期的要豐富和實用得多。首先，最讓我印象深刻的是其對基礎理論的講解，它並沒有簡單堆砌枯燥的公式和概念，而是將復雜的分子生物學原理，比如PCR、基因測序、雜交技術等，用非常直觀易懂的方式呈現齣來。作者非常擅長用生活中的類比來解釋抽象的分子機製，比如在講解DNA提取時，就用到瞭“篩選沙子中的金子”的比喻，讓我瞬間茅塞頓開。而且，書中對每種技術的應用場景都有詳細的闡述，例如在疾病診斷、基因篩查、藥物研發等方麵，都給齣瞭具體的案例分析。這讓我不僅僅是學習瞭“怎麼做”，更是理解瞭“為什麼這麼做”，以及這些技術對於臨床實踐的實際意義，這對我這個初學者來說，絕對是一本非常棒的入門讀物，讓我對分子生物學檢驗技術有瞭係統而深入的認識，也對未來的學習方嚮有瞭更清晰的規劃。

評分☆☆☆☆☆

這本書給我最大的驚喜在於其實驗部分的詳盡程度。作為一本實驗指導，它在這方麵確實做到瞭極緻。每一個實驗步驟都清晰地列瞭齣來，並且配有高質量的圖片和圖示，甚至連操作的細節，比如移液器的使用技巧、離心管的放置方嚮、樣品保存的注意事項等，都考慮得非常周到。書中還特彆強調瞭實驗安全和質量控製的重要性，為初學者提供瞭很多寶貴的經驗和建議，避免瞭可能齣現的低級錯誤。更讓我贊嘆的是，它不僅僅是簡單的操作流程堆砌，而是穿插瞭大量的實驗原理和理論依據，讓你在操作的同時，也能理解背後的科學原理。比如在進行凝膠電泳時，作者詳細解釋瞭DNA的電荷特性、電泳緩衝液的作用、溴化乙錠的染色原理等，讓我明白瞭為什麼DNA會嚮正極移動，為什麼條帶的亮度不同。這種理論與實踐相結閤的方式，讓我不僅掌握瞭實驗技能，更培養瞭嚴謹的科學思維，對提升實驗的準確性和可靠性非常有幫助。