临床分子生物学检验技术实验指导 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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王晓春，赵春艳，王志刚 编

图书标签:

• 临床分子生物学
• 分子生物学检验
• 医学检验
• 实验指导
• 临床医学
• 生物技术
• 基因检测
• PCR技术
• 核酸检测
• 实验室技术

出版社： 人民卫生出版社

ISBN：9787117203050

版次：1

商品编码：11701357

包装：平装

丛书名： “十二五”普通高等教育本科国家级规划教材配套教材 ， ，

开本：16开

出版时间：2015-04-01

用纸：胶版纸

页数：154

字数：250000

正文语种：中文

内容简介

　　《临床分子生物学检验技术实验指导》包括32个实验，内容分为七大部分：分子生物学检验技术实验室介绍；核酸的分离与纯化；核酸扩增技术；核酸分子杂交技术；分子克隆技术；其他分子检验技术；创新性实验、设计性实验及综合性实验。各校可根据自身条件、要求的不同进行取舍和组合，建议实验教学时数为30-60学时。
　　《临床分子生物学检验技术实验指导》具有以下特点：①注重基础知识和技能的训练，从微量移液器的使用到分子生物学实验室的规范操作及基本实验，从试剂配制到具体操作，力求详细，方便教学；②加强有临床应用价值或应用前景的技术及项目的介绍，如PCR技术、基因突变的检测等；③增加刨新性实验、设计性实验及综合性实验，增强对学生创新能力和综合素质的培养。有些综合性、设计性实验来自科研课题，内容新、方法先进，有利于学生掌握新知识、新技术。

目录

第一部分 分子生物学检验技术实验室
一、分子生物学检验技术实验须知
二、分子生物学检验技术实验室介绍
三、分子生物学检验技术常用仪器介绍
四、分子生物学实验室生物安全

第二部分 核酸的分离与纯化
实验1 真核基因组DNA的分离与纯化
实验2 真核细胞mRNA的分离与纯化
实验3 质粒DNA的提取
实验4 核酸的鉴定

第三部分 核酸扩增技术
实验5 聚合酶链反应
实验6 PCR-RF1P检测线粒体DNAA3243G异质性突变
实验7 等位基因特异性扩增法检测结核分枝杆菌rpoB基因突变
实验8 TRAP一银染法检测端粒酶活性
实验9 多重PCR检测测a-地中海贫血基因缺失
实验10 PCR-SSCP检测苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因外显子7突变
实验11 实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒（HBv）核酸
实验12 逆转录．聚合酶链反应检测甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA

第四部分 核酸分子杂交技术
实验13 探针的制备
实验14 DNA分子杂交
实验15 RNA分子杂交
实验16 荧光原位杂交
实验17 反向斑点杂交法检测B-地中海贫血

第五部分 分子克隆技术
实验18 DNA的限制性内切酶酶切反应
实验19 目的片段的连接
实验20 感受态细胞的制备及重组子转化
实验21 重组子的鉴定

第六部分 其他分子检验技术
实验22 真核细胞基因转染技术
实验23 Western印迹
实验24 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验25 H1A基因分型
实验26 乙型肝炎病毒基因分型(芯片法)
实验27 PCR-荧光探针法检测CYP2C19基因多态性

第七部分 创新性实验、设计性实验及综合性实验
实验28 采用导流杂交基因芯片技术进行人乳头瘤病毒基因分型
实验29 采用多重连接依赖探针扩增技术检测抗肌萎缩蛋白基因突变
实验30 人肝癌相关microRNA一21的定量检测
实验31 荧光素酶报告基因的制备
实验32 基因重组
附录 分子生物学检验技术实验中常用试剂和缓冲液的配制

精彩书摘

　　《临床分子生物学检验技术实验指导》：
　　三、分子生物学检验技术常用仪器介绍（一）微量移液器微量移液器（pipette）是分子生物学中最常用的计量仪器。其工作原理是通过内部密封的不锈钢活塞和弹簧，用手指按压和放松按钮来吸取和排出液体。在使用移液器的过程中，应注意以下几方面：①必须根据设计容量选用适当型号的移液器，调整数轮的读数不得超过其标称的容量范围，否则会损坏移液器；②吸取不同类别的溶液应更换吸头，防止试样之间交叉污染，不同个体的体液标本也应更换吸头，否则会严重影响检验结果；③新吸头在使用前可吸排溶液几次，浸渍吸头以消除测量误差；④移液器吸液后严禁倒置、平放，以免溶液流入内腔，损坏活塞；⑤移液器不用时应存放在专用的支架上，不得任意放置；⑥长时间不用或刚取出的新移液器应轻轻用手推动按钮上下按压几次，再进行正常使用；⑦注意正确读数，目前有的移液器是电子显示，一般难以出错，但对于手动调节的应特别注意。吸取液体时只能轻按第一挡，排出液体时需要按到第二挡；吸取液体时不可快速吸取。（二）水纯化装置分子生物学实验对用水质量要求极高，器皿需经酸泡和自来水洗净后用双蒸水漂洗数次，配制各种溶液更是要求用三蒸水或超纯水。水纯化装置主要包括：单蒸器、石英玻璃双蒸馏器、离子交换器及超纯水装置等。（三）离心机离心机是分子生物学实验中最常用的一类仪器，主要用于收集和分离细胞、细胞器和生物大分子等。实验用离心机可按其转速分为低速离心机（普通离心机）、高速离心机和超速离心机三种类型。
　　在分子生物学实验中应用最多的是台式高速离心机，一般分为常温和冷冻两种，最大转速一般在12000～20000g，这类仪器特别适合于生物大分子在Eppendorf管内微量操作后的处理，最少可供0.05ml样品的离心。
　　（四）电泳装置
　　电泳装置由电泳仪和电泳槽两部分组成。它主要用于检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，此外它还是分离、纯化、回收和浓缩样品的主要工具。
　　1.电泳仪它是作为电泳时的外加电源设备，将220V交流电整流后通过稳压器，它既能输出稳定的电流，又能输出稳定的电压，起到在被分离样品两端加外接电场的作用。常见的电泳仪有常压电泳仪（输出电压为0～500V，电流0～150mA）、中压电泳仪（输出电压400～1000V）、高压电泳仪（输出电压高于lkV），另外还有一些特殊的电泳仪，如毛细管电泳仪、脉冲电场凝胶电泳仪、转移电泳仪等。
　　2.电泳槽电泳槽是电泳的主要部件，是样品分离的场所。槽内装有电极、缓冲液槽、电泳支持架等，有的还有散热装置如循环水等。电泳槽种类很多，有平卧式、垂直板式、圆柱式、立板式、悬挂式等。
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前言/序言

《现代遗传学前沿探索》 内容梗概： 《现代遗传学前沿探索》是一部深度剖析当代遗传学研究最新进展的学术著作，旨在为遗传学领域的研究人员、高等院校师生以及对生命科学前沿充满好奇的读者提供一份全面、权威且具有前瞻性的导览。本书并非泛泛而谈，而是聚焦于当前遗传学领域最活跃、最具创新性的几个方向，通过精选的案例分析、理论阐释和技术解读，展现出遗传学研究的蓬勃生机与无限可能。 本书共分为八个章节，每一章节都代表着遗传学研究的一个重要维度或新兴热点。 第一章：基因组编辑技术的革命与伦理考量 本章深入探讨了CRISPR-Cas9等基因组编辑技术的原理、发展历程及其在基础研究和疾病治疗领域的颠覆性应用。从早期锌指核酸酶（ZFNs）和转录激活因子样效应物核酸酶（TALENs）的诞生，到CRISPR-Cas9系统的横空出世，本书详细梳理了基因组编辑技术从概念到实践的演进。重点阐述了CRISPR-Cas9系统的工作机制，包括guide RNA的设计、Cas9蛋白的切割功能，以及不同变体（如Cas12、Cas13）的应用。 在应用方面，本书详细介绍了基因组编辑技术如何被用于精确地修改基因序列，从而研究基因功能、构建疾病模型（如癌症、遗传性疾病模型）、开发新型基因疗法（如镰刀形贫血症、囊性纤维化治疗的初步探索）。此外，本章也并未回避基因组编辑技术所带来的严峻伦理挑战，包括对生殖系基因编辑的担忧、潜在的脱靶效应、基因隐私问题以及社会公平性等议题，并引用了相关国际组织和科学家的观点，引发读者对这项强大技术的深层思考。 第二章：表观遗传调控的网络解析 本章聚焦于表观遗传学，这一研究领域正日益揭示基因功能调控的复杂性。本书详细阐述了DNA甲基化、组蛋白修饰（如乙酰化、甲基化、磷酸化）以及非编码RNA（microRNAs, lncRNAs）等关键表观遗传机制。通过对这些调控元件的深入解析，读者将了解到它们如何影响基因转录、染色质结构以及细胞分化和发育。 本书重点介绍了多种用于解析表观遗传调控网络的技术，包括ChIP-seq（染色质免疫沉淀测序）、WGBS（全基因组亚硫酸氢盐测序）、RNA-seq（RNA测序）等，并结合最新研究成果，展示了如何通过整合分析这些多组学数据，来绘制出复杂的表观遗传调控图谱。此外，本章还探讨了表观遗传学在癌症、神经退行性疾病、衰老等重大疾病发生发展中的作用，并介绍了一些靶向表观遗传修饰的药物研发进展。 第三章：单细胞测序与异质性解析 单细胞测序技术的兴起，极大地推动了我们对生物系统异质性理解的深入。本章将全面介绍单细胞RNA测序（scRNA-seq）、单细胞ATAC测序（scATAC-seq）以及单细胞DNA测序（scDNA-seq）等关键技术。本书详细讲解了这些技术如何在单个细胞水平上捕捉基因表达、染色质可及性或基因组突变信息，从而揭示细胞群体中潜藏的细微差别。 本书着重分析了单细胞测序数据分析的挑战与策略，包括细胞簇识别、细胞类型鉴定、轨迹推断以及细胞间相互作用的预测。通过展示研究人员如何利用单细胞技术来解析肿瘤微环境的复杂性、追踪胚胎发育过程中细胞谱系的分化、识别免疫细胞的亚群及其功能状态，本书生动地说明了这项技术在肿瘤学、免疫学、发育生物学等多个领域的应用潜力。 第四章：宏基因组学与微生物组的生态洞察 宏基因组学以前所未有的视角，让我们能够窥探地球上数量庞大的微生物群落。本章深入探讨了宏基因组学研究方法，包括DNA提取、文库构建、高通量测序以及生物信息学分析。本书详细介绍了如何通过对环境样本（如土壤、水体、肠道）中的所有DNA进行测序，来识别微生物的组成、功能潜力以及它们之间的相互作用。 本书重点关注了人体微生物组的研究，阐述了肠道、皮肤、口腔等部位微生物群落的组成及其对宿主健康的影响。通过整合宏基因组学与宿主基因组学、代谢组学等数据，本书展示了如何揭示微生物与宿主生理、免疫、营养吸收以及疾病（如炎症性肠病、肥胖、精神疾病）之间的复杂关联。此外，本章还展望了宏基因组学在环境监测、生物修复以及农业应用等方面的广阔前景。 第五章：合成生物学：设计与构建生命系统 合成生物学是一门交叉学科，致力于通过工程化的方法来设计、构建和改造生物系统。本章将介绍合成生物学的基本原理，包括基因线路设计、标准生物部件的应用以及逻辑门电路在生物系统中的实现。本书深入阐述了如何利用模块化设计和工程化思维，来创造出具有全新功能的生物体或生物器件。 本书详细展示了合成生物学在多个领域的创新应用，包括设计能够生产药物或生物燃料的工程菌株、开发用于疾病诊断的生物传感器、构建能够进行环境修复的微生物系统，以及探索生命起源和演化的基本问题。本章还讨论了合成生物学所面临的技术瓶颈和安全风险，以及相关的政策法规和伦理框架的建设。 第六章：长链非编码RNA（lncRNAs）的功能网络解析 长链非编码RNA（lncRNAs）在基因调控中扮演着越来越重要的角色，尽管它们本身不编码蛋白质，却能以多种方式影响基因表达。本章将深入解析lncRNAs的种类、结构及其在细胞核和细胞质中的定位。本书详细阐述了lncRNAs如何通过招募蛋白复合物、改变染色质结构、影响mRNA稳定性或作为分子支架等机制，来调控基因转录、转录后修饰以及翻译过程。 本书重点介绍了当前解析lncRNA功能网络的关键技术，如RNA-seq、RNA-FISH（荧光原位杂交）、RNA-IP（RNA免疫沉淀）等，并结合最新的研究案例，展示了lncRNAs在肿瘤发生、细胞分化、发育调控以及免疫应答等过程中的核心作用。本章还探讨了lncRNAs作为疾病生物标志物和潜在药物靶点的应用前景。 第七章：基于AI的生物信息学与基因组学数据分析 人工智能（AI）和机器学习（ML）正在深刻地改变生物信息学和基因组学数据的分析方式。本章将探讨AI在基因组学数据解读中的前沿应用。本书详细介绍了如何利用深度学习模型来预测基因功能、识别疾病相关突变、注释基因组区域、预测蛋白质结构以及分析复杂的基因调控网络。 本书将展示AI在以下方面的具体应用：例如，利用神经网络分析大量的全基因组测序数据，以识别与特定疾病（如癌症、罕见病）相关的基因组变异；利用机器学习算法分析单细胞转录组数据，以实现更精确的细胞类型分类和轨迹推断；利用自然语言处理（NLP）技术从海量科研文献中提取生物学信息，加速科学发现。本章还讨论了AI在生物信息学领域面临的挑战，包括数据偏差、模型可解释性以及算法的泛化能力。 第八章：精准医疗的遗传学基石与未来展望 精准医疗，即根据个体的遗传背景、环境因素和生活方式来定制化的疾病预防和治疗方案，正成为现代医学发展的重要方向。本章将探讨遗传学在精准医疗中的关键作用。本书详细介绍了如何利用基因组学、转录组学、蛋白质组学等技术，来揭示个体间的遗传差异，并将其与疾病易感性、药物反应性以及治疗效果联系起来。 本书重点阐述了精准医疗在肿瘤治疗、罕见病诊断、药物基因组学以及疾病风险预测等方面的应用。例如，通过基因测序分析肿瘤基因突变，为患者选择最有效的靶向治疗药物；通过全外显子组测序，诊断罕见的遗传性疾病；通过药物基因组学，预测个体对某些药物的反应，避免不良反应。本章还展望了精准医疗的未来发展趋势，包括多组学数据整合、AI驱动的决策支持以及基因编辑技术的临床应用，并强调了数据隐私、伦理和社会公平性等问题的重要性。 《现代遗传学前沿探索》是一部内容充实、论述严谨、兼具理论深度与实践指导意义的著作。它不仅为读者呈现了当前遗传学领域最激动人心的研究成果，更启发了对未来生命科学发展方向的思考。本书的每一章节都力求做到逻辑清晰、条理分明，通过严谨的学术语言和丰富的实例，带领读者穿越现代遗传学研究的层层迷雾，领略生命奥秘的无穷魅力。

评分☆☆☆☆☆

让我感到惊喜的是，这本书在“疑难解答”和“常见问题分析”部分所花费的心思。在学习过程中，我总会遇到一些难以理解的细节或者操作上的困惑，而这本书恰恰满足了我的这些需求。它收集了许多临床分子生物学检验中经常出现的问题，并给出了详细的解答和解决方案。例如，在进行核酸提取时，如何处理复杂的样品基质，如何提高核酸的纯度和产量；在设置PCR反应时，如何优化退火温度和引物浓度，如何避免非特异性扩增；在进行数据分析时，如何应对批次效应，如何确保结果的可重复性等等。作者用一种非常贴近实际操作的口吻，将这些“过来人”的经验总结下来，避免了我们在实践中走弯路。这种“前人栽树，后人乘凉”的智慧，让我能够更高效地掌握技术，并对潜在的问题有预判和应对能力，大大提升了我的学习效率和信心。

评分☆☆☆☆☆

这本书给我最大的惊喜在于其实验部分的详尽程度。作为一本实验指导，它在这方面确实做到了极致。每一个实验步骤都清晰地列了出来，并且配有高质量的图片和图示，甚至连操作的细节，比如移液器的使用技巧、离心管的放置方向、样品保存的注意事项等，都考虑得非常周到。书中还特别强调了实验安全和质量控制的重要性，为初学者提供了很多宝贵的经验和建议，避免了可能出现的低级错误。更让我赞叹的是，它不仅仅是简单的操作流程堆砌，而是穿插了大量的实验原理和理论依据，让你在操作的同时，也能理解背后的科学原理。比如在进行凝胶电泳时，作者详细解释了DNA的电荷特性、电泳缓冲液的作用、溴化乙锭的染色原理等，让我明白了为什么DNA会向正极移动，为什么条带的亮度不同。这种理论与实践相结合的方式，让我不仅掌握了实验技能，更培养了严谨的科学思维，对提升实验的准确性和可靠性非常有帮助。

评分☆☆☆☆☆

我最近在翻阅一本名为《临床分子生物学检验技术实验指导》的书，尽管书名听起来很专业，但它提供的内容比我预期的要丰富和实用得多。首先，最让我印象深刻的是其对基础理论的讲解，它并没有简单堆砌枯燥的公式和概念，而是将复杂的分子生物学原理，比如PCR、基因测序、杂交技术等，用非常直观易懂的方式呈现出来。作者非常擅长用生活中的类比来解释抽象的分子机制，比如在讲解DNA提取时，就用到了“筛选沙子中的金子”的比喻，让我瞬间茅塞顿开。而且，书中对每种技术的应用场景都有详细的阐述，例如在疾病诊断、基因筛查、药物研发等方面，都给出了具体的案例分析。这让我不仅仅是学习了“怎么做”，更是理解了“为什么这么做”，以及这些技术对于临床实践的实际意义，这对我这个初学者来说，绝对是一本非常棒的入门读物，让我对分子生物学检验技术有了系统而深入的认识，也对未来的学习方向有了更清晰的规划。

评分☆☆☆☆☆

我特别欣赏这本书在数据分析和结果解读部分的处理方式。很多技术书籍往往会把这一部分写得非常笼统，但这本书却给了我耳目一新的感觉。它详细介绍了如何对PCR产物、基因测序结果、免疫印迹等实验数据进行初步的处理和分析，包括常用的统计学方法、图表制作以及结果的图示化展示。更关键的是，它深入剖析了如何根据实验结果来判断一个分子生物学指标的临床意义，比如如何解读基因突变报告，如何评估PCR扩增的特异性和灵敏度，以及如何识别假阳性或假阴性结果。书中提供了大量的实际病例分析，将理论知识与临床诊断紧密联系起来，让我能够将学到的技术应用到实际的临床情境中去。比如在解读一个基因检测报告时，它会告诉你这个基因突变可能导致哪些疾病，治疗上有什么样的选择，预后如何等等，这种“学以致用”的引导，对我这样希望将理论知识转化为实践能力的读者来说，非常有价值。

评分☆☆☆☆☆

这本书最让我印象深刻的是，它不仅仅是一本技术手册，更是一本培养临床思维的工具书。在讲解每一项技术时，作者都非常注重将其与实际的临床应用联系起来，详细阐述了该技术在疾病诊断、病情监测、治疗方案选择、预后评估等方面的作用。例如，在介绍基因突变检测时，它会详细说明不同基因突变与不同癌症之间的关联，以及这些检测结果如何指导靶向治疗。在讨论传染病病原体检测时，它会分析不同检测方法的灵敏度和特异性，以及如何根据检测结果来判断感染状态和制定治疗方案。书中还穿插了一些案例研究，通过分析真实的临床病例，来展示分子生物学检验技术是如何在诊断和治疗过程中发挥关键作用的。这种以临床需求为导向的讲解方式，让我不仅学会了操作，更理解了技术的价值和意义，也让我对分子生物学在现代医学中的地位有了更深刻的认识，非常有助于我理解和应用相关知识。