内容简介
《植物线虫分子生物学实验教程》较为系统地介绍了植物线虫学分子生物学实验常用技术方面的基础实验和近几年发展起来的实验方法和实验原理、流程、操作步骤及注意事项等,包括:DNA的提取、RNA的提取、原位杂交、免疫共沉淀、龄期表达、酵母双杂交、寄主免疫反应调节和RNAi等内容。该书可作为高等农林院校植物保护专业及农林相关专业的植物线虫学实验教学基础教材,也可供高等院校和科研机构从事植物线虫分子生物学研究的科研工作者参考。
目录
实验一 植物线虫DNA提取
实验二 植物线虫分子鉴定方法
实验三 植物线虫RNA提取
实验四 植物线虫基因的龄期表达分析
实验五 RNA沉默
实验六 植物线虫基因的原位杂交研究方法
实验七 植物线虫效应蛋白在寄主中的免疫定位
实验八 绿色荧光蛋白一植物线虫效应蛋白融合表达的载体构建、表达和观察
实验九 植物线虫调节寄主免疫反应的研究方法——对ROS抑制
实验十 植物线虫调节寄主免疫反应的研究方法——对胼胝质沉积抑制
实验十一 植物线虫调节寄主免疫反应的研究方法——对防卫基因表达的抑制
实验十二 植物线虫调节寄主免疫反应的研究方法——对ETI反应的抑制
实验十三 酵母双杂交cDNA文库构建方法
实验十四 酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白
实验十五 荧光双分子互补载体构建与表达方法
实验十六 免疫共沉淀实验方法
附录1 实验室常用试剂配制
附录2 缩写词对照表
前言/序言
《植物线虫分子生物学实验教程》精选了植物线虫分子生物学传统的和最新发展起来的实验技术,这些实验技术是植物线虫研究方向甚至植物保护学专业的学生需要掌握的实验方法。
本教材涵盖了植物线虫分子生物学实验6方面内容,共16个实验,包括核酸操作基本技术:如大量线虫DNA提取、微量线虫DNA提取、大量线虫RNA提取和微量线虫RNA提取;基因表达研究技术:如基因龄期表达分析方法和基因原位杂交方法:蛋白质定位研究方法:如免疫定位方法和GFP-植物线虫效应蛋白融合表达;植物线虫效应蛋白对寄主免疫反应影响的研究方法:如效应蛋白对ROS抑制、对胼胝质抑制、对防卫基因表达抑制和对ETI反应抑制的检测方法;线虫效应蛋白与寄主相互作用的研究方法:如酵母双杂交、荧光双分子互补实验和免疫共沉淀;其他植物线虫分子生物学实验技术:如线虫分子鉴定方法和RNA沉默等。
本教材主要编写分工如下:廖金铃(华南农业大学)编写实验一植物线虫DNA提取、实验三植物线虫RNA提取和实验四植物线虫基因的龄期表达分析;卓侃(华南农业大学)编写实验二植物线虫分子鉴定方法、实验五RNA沉默、实验六植物线虫基因的原位杂交研究方法、实验八绿色荧光蛋白——植物线虫效应蛋白融合表达的载体构建、表达和观察;林柏荣(华南农业大学)编写实验七植物线虫效应蛋白的免疫定位、实验九植物线虫调节寄主免疫反应的研究方法——对ROS抑制、实验十对胼胝质沉积抑制、实验十一对防卫基因表达的抑制、实验十二对ETI反应的抑制、实验十三酵母双杂交cDNA文库构建方法、实验十四酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白、实验十五荧光双分子互补载体构建与表达方法、实验十六免疫共沉淀实验方法。在编写过程中,华南农业大学扈丽丽博士,研究生阳盼、孙丹丹和本科生李君霞协助资料输入、编排和校对等工作,谨此致谢。
本教材的实验内容从实验设计、实验选材到实验操作都经过多次实践和证明,并充分考虑了内容的实用性。通过学习和训练,本教材能有助提高学生的实验操作和实验设计能力,适合高等院校本科生和研究生使用,也可供高等院校和科研机构从事植物线虫分子生物学研究的科研工作者参考。本教材得到国家自然科学基金(31471750:31601614和31401716)和华南农业大学教育教学改革与研究项目(JG16062)的资助。
由于编者水平有限,不当和错误之处在所难免,敬请指正。
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