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王廷华，董坚.习杨彦彬 著

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• 克隆技术
• DNA重组
• 生物工程

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出版社： 科学出版社

ISBN：9787030380111

商品编码：28734063782

包装：平装

出版时间：2013-06-01

基本信息

书名：基因克隆理论与技术(第三版)

定价：69.00元

作者：王廷华,董坚.习杨彦彬

出版社：科学出版社

出版日期：2013-06-01

ISBN：9787030380111

字数：

页码：

版次：3

装帧：平装

开本：16开

商品重量：0.4kg

编辑推荐

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内容提要

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《基因克隆理论与技术（第3版）》是《21世纪生物技术系列》的一个分册，全书分上、下两篇。上篇介绍了基因的结构与功能、蛋白质的结构与功能、基因的调控等分子生物学的基本理论基因克隆的载体、基因克隆的工具酶等，以及基因克隆技术在诊断、治疗及生物制药中的应用与进展；下篇在基因构建、干细胞转染及纳米载体实验技术基础上还介绍了基于病毒载体的基因克隆、转染及过表达技术。
《基因克隆理论与技术（第3版）》可供生物医学专业研究生、本科生及从事分子生物学研究的科研人员阅读和实验时参考。

目录

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上篇 基因克隆理论
章 概论
节 基因研究的历史回顾
第二节 遗传的物质基础
第三节 基因和基因克隆的概念
第四节 基因工程的研究内容和安全性
第二章 基因的结构和功能
节 核酸的结构和功能
第二节 遗传物质的组织结构
第三节 基因组的结构和功能
第三章 蛋白质的结构和功能
节 蛋白质的基本单位和分类
第二节 蛋白质的分子结构和理化性质
第三节 蛋白质的生物学功能
第四章 基因克隆中常用的工具酶
节 限制性核酸内切酶
第二节 DNA聚合酶
第三节 DNA连接酶
第四节 修饰酶
第五章 基因克隆的载体
节 质粒载体
第二节 噬菌体载体
第三节 病毒载体
第四节 其他载体
第六章 基因的表达和调控
节 原核生物基因的表达调控
第二节 真核生物基因的表达调控
第七章 基因克隆在治疗和诊断中的应用与进展
节 基因治疗研究进展
第二节 基因诊断的研究进展
第八章 基因克隆技术在生物制药中的应用
节 概况
第二节 基因工程药物
第三节 基因工程抗体
第四节 基因工程疫苗
第五节 核酸疫苗
第六节 生物医药的发展方向
下篇 基因克隆技术
第九章 分子生物实验中的常用仪器及试剂的配制
节 分子生物实验室的常规仪器及设备
第二节 常用试剂的配制
第十章 琼脂糖电泳和聚酰胺凝胶电泳
节 原理
第二节 琼脂糖电泳
第三节 聚酰胺凝胶电泳
第四节 电泳的影响因素
第五节 电泳中常用的指示剂和染色剂
第十一章 目的基因克隆
节 化学合成法获取目的基因
第二节 PCR扩增法获取目的基因
第三节 RT-PCR法获取目的基因
第十二章 载体的准备
节 感受态细胞的制备和质粒的转化
第二节 质粒DNA的提取
第十三章 目的基因与载体的连接
节 目的基因和载体的酶切
第二节 从凝胶中回收DNA
第三节 目的基因和载体的连接
第十四章 重组载体的检测
节 酶切和电泳检测
第二节 DNA序列测序鉴定
第十五章 重组载体的转染
节 磷酸钙共沉淀法
第二节 脂质体法
第三节 反转录病毒感染法
第四节 腺病毒载体转染法
第五节 结果和转染方法的选择
第十六章 重组体插入基因、RNA和表达产物蛋白质的检测
节 Southern blot
第二节 Northern blot
第三节 Western blot
第十七章 大鼠BDNF基因的构建及骨髓间充质干细胞转染
节 实验原理与实验目的
第二节 实验设备、试剂及配制
第三节 实验步骤
第十八章 纳米粒子介导人生存素基因修饰嗅鞘细胞实验
节 实验原理
第二节 实验所需设备、试剂及其配制
第三节 实验步骤
第四节 实验结果
第五节 结果分析
第十九章 小鼠NT-4基因的体外构建、骨髓间充质干细胞转染和脑内移植
节 实验目的及实验原理
第二节 小鼠NT-4基因的体外构建及骨髓间充质干细胞转染
第三节 NT-4-GFP转基因骨髓间充质干细胞脑内移植
第四节 结果分析与经验体会
第二十章 慢病毒携带人端粒酶基因hTERT的基因克隆技术
节 实验目的
第二节 实验设备、试剂及其配制
第三节 实验步骤
第四节 实验结果
第五节 结果分析
第六节 经验体会
彩图

作者介绍

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文摘

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序言

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基因编辑的伦理、法律与社会挑战：一部多维度的深度剖析 图书简介 本书聚焦于当代生物技术领域最具争议性与前沿性的议题——基因编辑技术（如CRISPR-Cas9系统）的快速发展所引发的深刻伦理困境、法律真空与社会影响。我们不探讨基因克隆的基础技术细节，而是将视角转向技术落地后，人类社会必须面对的复杂抉择与治理难题。 随着基因编辑工具的精度和可及性大幅提升，从生殖细胞编辑到体细胞治疗，再到农业和生态系统的改造，人类前所未有地获得了“重写生命蓝图”的能力。这种能力带来了治愈遗传疾病的巨大希望，同时也敞开了“设计婴儿”、潜在的社会不平等加剧以及对自然生态系统不可逆转的干预等潘多拉魔盒。 本书旨在为政策制定者、法律学者、生物伦理学家、社会学家以及关注科技进步的公众，提供一个全面、深入且无偏见的分析框架。我们认为，任何孤立地看待技术或伦理问题的尝试都是不完整的；治理的有效性，恰恰依赖于跨学科对话的深度与广度。 第一部分：技术驱动下的伦理重构 本部分将首先概述当前主流基因编辑技术（重点是CRISPR家族的最新迭代和递送系统）的最新进展，但其核心目标是界定“伦理边界”的移动。 1.1 从“治疗”到“增强”的界限模糊化： 我们将细致分析医学界长期依赖的“治疗性干预”与“非治疗性增强”之间的传统区分在基因编辑时代所面临的严峻挑战。例如，是否可以编辑与智力、寿命或运动能力相关的多基因位点？这种增强的社会成本和收益如何权衡？我们深入探讨了“合理医疗需求”的定义是否需要被扩展或重新限定。 1.2 世代影响与“永久性”责任： 生殖细胞编辑（Germline Editing）是本书伦理讨论的焦点。与仅影响个体的体细胞编辑不同，生殖细胞编辑的修改将遗传给后代，构成对未来世代基因库的永久性干预。本章详细审视了“知情同意”原则在无法征得未来个体同意的情况下应如何适用。我们引入了“世代间公平”（Intergenerational Equity）的原则，探讨我们是否有权以不可逆转的方式改变人类的演化轨迹。同时，我们分析了不同文化和宗教背景下对生命神圣性与自然秩序的认知差异，以及这些认知如何影响对“人为干预”的道德接受度。 1.3 公平获取与全球治理的缺口： 如果基因疗法或增强技术能显著提高个体健康水平或认知能力，那么资源分配的不平等将如何固化甚至加剧社会阶层固化？本书探讨了“基因鸿沟”（Genetic Divide）的形成机制，并评估了现有公共卫生体系在保障这些前沿技术普惠性方面的结构性缺陷。我们特别关注发展中国家在获取或被动承受技术风险方面的地位。 第二部分：现有法律框架的失效与重构 基因编辑技术的速度远远超过了各国法律体系的制定速度。本部分专门剖析了现行法律在应对这些新挑战时的滞后性、模糊性以及冲突点。 2.1 国际法与国家主权的交锋： 尽管国际上对生殖细胞编辑存在普遍的审慎态度，但缺乏具有约束力的全球性条约。我们对比了欧洲（如《奥维多公约》的限制性立场）与部分亚洲国家在监管上的差异化路径，分析了“监管套利”（Regulatory Arbitrage）的风险——即科学家为规避严格监管而选择在宽松司法管辖区进行实验。本章还详细梳理了世界卫生组织（WHO）和联合国教科文组织（UNESCO）在制定指导方针方面所做的努力及其法律效力限制。 2.2 知识产权与生命体的专利化： 基因编辑工具本身（如核心专利）的归属问题，直接影响了技术的开放性和成本。本书深入分析了当前关于“基因序列是否可专利”以及“编辑工具是否构成制造方法”的法律争端，探讨了如何平衡创新激励与公共利益的维护。我们研究了旨在促进技术共享的“专利池”机制在生物技术领域的适用性与局限。 2.3 责任认定与损害赔偿： 针对基因编辑可能导致的意外后果（如脱靶效应或长期不可预见的健康损害），现有的医疗事故法和产品责任法往往难以适用。本部分提出了在基因编辑领域建立新型“风险分担机制”和“过错推定”的法律模型，特别是针对生殖细胞编辑导致的后代损害，应由谁（研究者、机构、资助方）承担何种程度的法律和经济责任。 第三部分：社会接受度与公共参与机制 技术治理不仅是法律和伦理专家的任务，更是全社会的共同责任。本书强调了建立有效、透明的公共参与机制的重要性。 3.1 风险沟通的艺术与科学： 基因编辑的复杂性使其难以被公众准确理解。我们分析了过去几例重大生物技术事件（如早期转基因作物争议）中的信息传播失误，并提出了在基因编辑领域，如何设计既能传达科学准确性，又不引发不必要恐慌的风险沟通策略。 3.2 协商式民主的应用： 本章探讨了引入“公民评议会”（Citizens' Juries）或“共识会议”（Consensus Conferences）等协商式民主工具，让普通公民深度参与到技术监管政策制定的过程中的案例研究与可行性分析。目标是超越专家驱动的决策模式，确保技术发展方向符合更广泛的社会价值观。 3.3 社会想象与技术抵制： 最后，我们审视了科幻文学、电影等文化产品如何塑造公众对基因技术的想象。这种“文化输入”有时会固化对技术的非理性恐惧（如对“雅利安人”式的优生学的担忧），有时又会过度美化其潜力。了解这些社会想象有助于制定更具适应性的治理框架。 本书的最终目标是清晰地勾勒出基因编辑技术发展面前的“治理路线图”，强调在拥抱治愈疾病潜力的同时，必须以前所未有的审慎态度，构建一个能够驾驭“重写生命”力量的伦理、法律与社会框架。

评分☆☆☆☆☆

拿到这本厚重的书籍时，我的第一反应是“它真的能讲明白吗？”毕竟涉及的主题如此宏大且专业。然而，这本书的排版和图示设计简直是教科书级别的典范。那些复杂的蛋白质结构图、信号通路图，无一不制作得精美且信息量适中，极大地减轻了阅读的认知负担。不同于以往我读过的某些教材，它在概念的引入上非常克制，总是在确保读者理解了基础后才逐步叠加更复杂的知识点。我尤其欣赏它在章节末尾设置的“思考与讨论”环节，这些问题往往不是简单的知识点复述，而是需要整合前后章节信息才能回答的综合性挑战。这迫使我必须主动去建构自己的知识体系，而不是被动地接受信息。这本书的价值在于，它不仅教会你“是什么”，更教你“为什么是这样”，并鼓励你去探索“还可以是什么”。

评分☆☆☆☆☆

我是一个对技术细节非常挑剔的人，很多书籍在描述技术流程时总会含糊其辞，只给一个大概的框架。但这本书完全没有这个问题。它对每一个关键步骤的试剂配比、温度控制、反应时间都有明确的界定，甚至连最容易出错的样本处理环节都给出了详细的“避坑指南”。这种对细节的执着，体现了作者深厚的实践经验。当我按照书中的某个标准程序进行操作时，结果的稳定性和可重复性都得到了极大的提升。这本书的实用价值在于，它不仅仅是理论的载体，更是标准操作规程（SOP）的完美范本。对于初入这个领域的新手来说，它提供的不仅仅是知识，更是可以立刻投入使用的“工具箱”和“说明书”，大大缩短了从理论到实践的鸿沟。

评分☆☆☆☆☆

这本书的编排逻辑让我印象非常深刻，它没有采用传统的“由浅入深”的线性叙事，而是采用了“核心概念先行，应用案例穿插”的网状结构。开篇就抛出了几个具有颠覆性的前沿观点，吊足了我的胃口，然后才回过头来系统性地拆解支撑这些观点的基础理论。这种“先给糖再给盐”的策略，极大地保持了阅读的兴奋感。我尤其欣赏它对跨学科交叉的探讨，书中多次将生物学理论与信息科学、材料科学的最新进展相结合，描绘了未来科技融合的宏伟蓝图。读完后，我感觉自己对未来生物技术的发展方向有了一种更具前瞻性的把握，它不再是一门孤立的学科，而是驱动整个科技进步的核心引擎之一。这本书是激励人心的，它让人相信，我们正在经历的这场科技革命是多么激动人心。

评分☆☆☆☆☆

这本书简直是打开了新世界的大门，让我对生物学的理解上升到了一个全新的层次。初读时，那些复杂的分子机制和精密的实验流程差点把我劝退，但作者的叙述方式非常巧妙，总能在关键时刻用生动的比喻和清晰的逻辑链条将晦涩的理论梳理得井井有条。特别是关于基因编辑技术的部分，作者没有停留在理论层面，而是深入剖析了每种技术背后的伦理考量和实际应用案例。我特别喜欢它对历史回顾的处理，清晰地勾勒出从早期发现到如今尖端研究的演进脉络，让人能真切感受到科学是如何一步步发展起来的。读完后，我感觉自己不再是旁观者，而是对生命科学的前沿有了更深切的参与感和思考能力。这本书对于任何想在分子生物学领域深耕的人来说，都是不可或缺的“通关秘籍”。它不仅仅是知识的堆砌，更是思维方式的塑造，让我学会了如何带着批判性的眼光去看待每一个实验结果和每一项新的发现。

评分☆☆☆☆☆

说实话，这本书的阅读体验与其说是在读书，不如说是在进行一次深入的学术研讨会。作者的语言风格非常严谨，但又不失学者的热情。我特别关注了其中关于某些争议性研究的论述，发现作者处理得极为平衡和客观，清晰地列举了正反两方的论据和证据，没有倾向性地为任何一方背书，而是将判断权交给了读者。这种公正的态度在专业书籍中是极为宝贵的。我花了好几天时间去对照书中的某些流程图和我们实验室正在进行的项目进行了比对，发现书中的细节描述精确到了令人发指的地步，很多我们实验中遇到的瓶颈问题，在书中都能找到理论上的解释和潜在的解决方案的指引。这本书对实践的指导意义远超我的预期，它更像是一位经验丰富、知识渊博的导师随时在你身边指导。